نريد أن نقيم الوضع معك. لقد مرت ثمانية أشهر منذ يوليو 2018 وخلال هذه الفترة الزمنية حققنا نتائج مرضية للغاية. لقد قدمنا ​​برنامجًا بحثيًا وفيما يتعلق بتحليل اللقاحات ، فنحن قادرون على تحديد نقطة مرجعية ، مع تحقيق الأهداف ، تلك الأهداف التي تم الانتهاء منها وتلك التي تم التخطيط لها فقط في الوقت الحالي.

بادئ ذي بدء ، تم التحقق من تحليلات مركبين لكل لقاح عن طريق المعايير ، باستخدام معايير تحكم معتمدة بتركيز بترتيب ميكروغرام / مل. المركبات التي اخترناها هي من بين تلك المعروفة بملف تعريف المخاطر الحرج الخاص بها. نحن نتحدث عن كمية تراكمية ، إجمالي المبلغ المعترف به كهويات وتلك التي يجب تحديدها ، والتي يمكن تقديرها في حدود 2 ميكروغرام / مل ، على عكس إرشادات EMA / FDA.

أعطت هذه الاختبارات نتائج إيجابية ، وبالتالي فهي تؤكد تمامًا طريقة التحليل! من المحتمل أن تكون التلوثات ناتجة عن ظواهر وموضوعات عملية التصنيع المختلفة والمتغيرة. ما لوحظ في سياق الدراسات هو تباين "بين الدُفعات" للتركيب ، مما يجعلنا نفترض أن هناك بعض الخطوات على طول عملية تصنيع المنتج بأكملها والتي يصعب التحكم فيها.

هذه التحليلات سمحت لنا بتحقيق الخطوات التالية:

• تقييم المطابقة للتكوين على النحو المبين في ورقة بيانات اللقاح
• الكشف عن الملوثات الكيميائية والبروتينية / الببتيد ، وكذلك تلك المستمدة من المواد الوراثية
• دراسة تأكيدية للمركبات الكيميائية والبروتينية المستهدفة من خلال شهادات التفتيش القياسية

تم تقديم اللقاحات التالية للفحص الأولي:

• Infanrix Hexa - GlaxoSmithKline Biologicals sa
• Priorix Tetra - GlaxoSmithKline SpA
  
• Hexyon - سانوفي باستور أوروبا
• Gardasil 9 - لقاحات MSD

وقد تم تحليل هذه اللقاحات الأخرى كما الفحص الأولي:

• لقاح الحصبة مباشر BP - Poonawalla Group (Profarma AG، Baar)
• MMR vax Pro - MSD Vaccins، France
• PolioInfanrix - جلاكسو سميث كلاين ، بلجيكا
• فلواد - Seqirus Srl ، سيينا
• Vivotif - PaxVax ، المملكة المتحدة

التقنيات المستخدمة

الدراسة مبنية على:

تحليل الشوائب والتلوث الكيميائي والبروتين

• تم استخدام نظام التحليل LC-SACI / ESI-MS المرتبط بمنصة SANIST الرائدة لإجراء فحص أولي لتحديد اللقاحات محل الاهتمام ، وكذلك لتأكيدها بمعايير التحكم ، مع حد أدنى بين النانوجرام و ميكروغرام / جرعة
• تم استخدام تقنية MALDI-TOF-MS لدراسة الجزيئات الكبيرة غير القابلة للذوبان الموجودة في اللقاحات

تحليل المواد الوراثية

• اختبار وجود الأحماض النووية (DNA / RNA) ذات الأصل البشري والحيواني والكائنات الحية الدقيقة (الفيروسات والبكتيريا) باستخدام طريقة تسلسل الجيل التالي ، والتي مكّنت من تقدير كمية تتابع المادة الوراثية الموجودة في اللقاحات بشكل محدد للغاية وطريقة دقيقة
• التحقق من مراسلات البكتيريا وفيروسات اللقاح الحية الموهنة وغير المعطلة المتواليات الجينية (وجود المتغيرات الوراثية)

التحليل الكمي للمعادن

• جعلت تكنولوجيا ICP-MS من الممكن تقدير المعادن الموجودة في اللقاحات بحد أدنى 5ng / جرعة.

تحليل التلوث الكيميائي والبروتين

بعد الفحص الأول الذي حدد وجود المئات من الإشارات الكيميائية داخل اللقاحات ، تم إجراء اختبارات تأكيد بواسطة معايير من 2 مركبات لكل لقاح ، وذلك باستخدام معايير مراقبة معتمدة ، تم اختيارها من تلك المعروفة بملف تعريفها الخطير والحرج. الكمية غير المتبقية (مثل مكونات اللقاحات التي يتم اعتبارها ، وبالتالي يتم تضمينها في ورقة البيانات التقنية وتحديدها كمياً).

أعطت هذه الاختبارات نتائج إيجابية ، وبالتالي فإنها تؤكد بشكل كامل طريقة التحليل. حتى الآن تم اختبار مركبين فقط لأسباب اقتصادية فقط ، في الواقع هذه الدراسة ليست كاملة لأنها محدودة بسبب التكلفة الكبيرة للمسح لكننا اخترنا تحديد المعايير الأكثر ملاءمة للقيود التنظيمية وعلى يجب اعتبار أن هذا النوع من التحقيقات المتعمقة لا يجب أن يكون متروكًا لنا.

من المرجح أن تكون التلوثات المرصودة ناتجة عن ظواهر وموضوعات عملية التصنيع المختلفة والمتغيرة. ما لاحظناه على طول خطوات البحث هو تباين بين القطع للتركيب ، مما يجعلنا نفترض أن هناك بعض الخطوات على طول عملية تصنيع المنتج بأكملها والتي يصعب التحكم فيها. التركيز في حدود ميكروغرام / مل. أما بالنسبة للكمية التراكمية ، فمن الممكن تقديرها على أساس تقييم شبه كمي (حيث أن معظم المركبات غير معروفة) أن الملوثات تقع في حدود 50 ميكروغرام / مل. هذه بيانات مهمة لأن إرشادات EMA / FDA واضحة جدًا بشأنها. يجب ألا تكون الملوثات موجودة (أقل من مستوى الكشف) أو إذا كانت موجودة فيجب تحديدها جيدًا ويجب إثبات أن الطرق المناسبة لتقليلها قد تم تطبيقها. في هذه الحالة ، لا تقل الملوثات عن مستوى قدرة جهاز الكشف (نانوغرام / مل) لذلك نعتقد أن المنتج لا يطبق أي طرق تنقية. أما عن وجود فيروسات عرضية فلا وجود لها لأنها يجب ألا تكون موجودة على الإطلاق.

• قيد التقدم - تحليلات التأكيد البينية لهذه المركبات جارية.
  سيتم إعادة تأكيد المركبات التي تم تحديدها وفقًا للمعيار باستخدام نفس التكنولوجيا بواسطة مختبرات مختلفة. أحد أهدافنا هو تنسيق هذا المشروع أيضًا بدعم وتعاون من الجمعيات الدولية.
  
  
• في التقدم - دراسة حركية هطول الأمطار من مولدات المضادات المرتبطة بالألمنيوم.

تحليل الميتاجينوم

• في التقدم - تحليل مع معايير إضافية السيطرة الحمض النووي والحمض النووي الريبي دفعة أخرى لقاح.
  منذ بداية هذا المشروع ، كان من الواضح لنا أن التحليلات ، لتلبية المتطلبات الضرورية من قابلية التكرار ودقة البيانات ، يجب تنفيذها باستخدام الأجهزة الأكثر تطوراً ، ومن خلال مراقبة أي تنوعات ضمن نفس الدفعة وبين مختلف دفعات. نظرًا لأننا نواصل التحقيقات ، يتم تحليل الكثير بشكل مستمر ، ومن الواضح أنه يتوافر في الميزانية وتوافر المنتجات.
  
  
• قيد التقدم - تحليل تسلسل جينوم الحمض النووي للجنين من خط خلايا MRC-5.
  منذ العرض الأول ، أتيحت لنا الفرصة للتحقق بشكل قياسي من أن الخطوط الثنائية المستخدمة كانت MRC-5 ، كما هو مذكور في ورقة البيانات التقنية. نود تعميق دراسة هذا الخط الخلوي أيضًا بحقيقة أن وجوده رائع من حيث الكم والأبعاد.
  
  
• في التقدم - دراسة المتغيرات الطفيفة (شبه الأنواع) من الحصبة والنكاف وفيروسات الحصبة الألمانية.
  مقارنة بالتقرير الأول في يوليو 2018 (https://bit.ly/2UCC2iS) لقد أجرينا دراسة متعمقة للمتغيرات الطفيفة لأن الطفرات في فيروسات اللقاح الموهنة لم تكن الوحيدة الموجودة. تثير هذه المشكلة أيضًا شكوكًا كبيرة حول فعالية اللقاح وسلامته. ستستغرق هذه النتيجة وقتًا أطول من التقارير الأخرى نظرًا لأن التحقق من تسلسل الطفرات يجب أن يتم يدويًا.
  
  
• في التقدم - تحليل التأكيد البيني
  لقد حددنا المختبرات الأجنبية والوطنية التي كلفنا بتكرار التحليل وفقًا للمعايير. هذه النتيجة ستكون متاحة قريبا.

مشاريع تحت التقييم

دراسة لقاح مستضدات الفاعلية: يجب إجراء هذه الدراسة في مركز معتمد من قبل الجهات التنظيمية للدراسة السابقة لللقاحات. الهدف من ذلك هو التحقق مما إذا كانت مستضدات اللقاح قادرة على إنتاج أجسام مضادة معينة أو ربطها (من المفترض نظريًا أن هذه الأجسام المضادة واقية ، لكن هذا التحليل لا يسمح لنا بإثبات أن اللقاح قادر على الحماية من المرض). قد تكون تكلفة هذه الخطوة ذات صلة ، وبالتالي فإن المشروع هو مجرد فرضية.

تنزيل: CORVELVA-تقرير-على رأس النتائج obtained.pdf

ترجم من قبل فريق CLiVa - www.clivatoscana.com