استهل

بادئ ذي بدء ، نود أن نشكر التعليقات المفيدة للغاية التي قدمها أولئك الذين شاهدوا نتائج التحليلات ، التي أجريت في سياق أنشطة البحث العلمي ، المتعلقة بمنتجات Priorix tetra و Infanrix Hexa. كانت القضايا الحرجة المكشوفة مفيدة في الواقع من أجل إضافة تكامل علمي تقني قادر على توضيح العمل المنجز. نعتقد أنه لا يمكن الوصول إلى استنتاجات حول البيانات التي تم الحصول عليها والتي يمكن أن تكون مفيدة للمجتمع العلمي بأكمله وللأشخاص الذين يلجأون إليها إلا من خلال شركة سليمة للرؤى العلمية.

1. حالة من الفن

أدت الدراسات الأولية (الفحص غير الخاضع للتأكيد) للملف الجزيئي البيولوجي والتمثيل الغذائي والبروتيومي ، التي أجريت على منتجات Priorix Tetra و Infanrix Hexa ، إلى تكوين صورة ملخصة في النقاط التالية:

1. وجود إشارات تحليلية مختلفة لا يمكن ربطها بمركبات معروفة من خلال عمليات البحث في قواعد بيانات Metlin ^1-2 و KEGG ³. لذلك ، ظهرت صورة مرتبطة بتعقيد كبير في تكوين المنتجات التجارية.
2. وجود بروتينات غير معلنة في النشرة في منتج Priorix Tetra. يمكن أن تكون الأخيرة مرتبطة مع المخلفات من عملية الإنتاج
3. عدم الكشف عن المستضدات التي تم الإعلان عنها داخل منتج Infanrix Hexa. تألفت تقنية التحليل من الهضم الأنزيمي مع التربسين المرتبط بتقنيات الطيف الكتلي. ^4-5

أثارت هذه البيانات عدة تعليقات ، خاصة فيما يتعلق بالنقطة C - يتم في الواقع اكتشاف البروتينات باستخدام نهج قياسي ، معترف به دوليا لأكثر من 10 سنوات ⁴الهضم من خلال انزيم التربسين ⁴. يتم فصل الببتيدات التي تم الحصول عليها وبالتالي كروماتوغرافيا وتحليلها بواسطة مطياف الكتلة ^4-5. كانت الملاحظة الرئيسية متأصلة في حقيقة أن المركبات المساعدة التي أساسها الألمنيوم موجودة في اللقاحات التي يمكن أن تمنع عملية الهضم الأنزيمي.

أتاحت البيانات التي تم الحصول عليها فيما بعد تقديم إيضاحات جوهرية ، خاصة فيما يتعلق بالنزاع الموجود في النقطة ج.

2. رؤى جديدة وتحليلات

2.1 مزيد من المعلومات حول تحليل منتج Infanrix Hexa

قبل الشروع في توضيح البيانات المكتسبة الجديدة بشأن لقاح Hexyon و Gardasil 9 ، لا بد من الإجابة على السؤال المتأصل في الشك الذي أثير بشأن تثبيط نشاط التحلل البروتيني للتربسين الناجم عن وجود المواد المساعدة القائمة على الألومنيوم. في لقاح Infanrix Hexa. في هذا الصدد ، يجب تحديد أن التحكم في الهضم موجود دائمًا في الجهاز الهضمي التريبتي. في الواقع ، فإن التربسين المستخدم في عملية الهضم ، على الرغم من هندسته لغرض منع التحلل الذاتي ، يحتوي على نسبة مئوية صغيرة من الأخير والذي يؤدي في حالة النشاط الأنزيمي إلى الحصول على الجزء الذي يحتوي على m / z 842 وتسلسل الببتيد التالي : VATVSLPR. تم اكتشاف هذه القطعة في الواقع داخل الجهاز الهضمي التريبتي لمنتج Infanrix Hexa كما يمكن التحقق منها بواسطة كروماتوجرام استخراج الأيونات (الشكل 1).

الشكل 1: كروماتوجرام استخراج أيون المرتبط بالأيون عند نسبة م / ي 842 المكتشفة في العينة المتعلقة بدفعة المنتج Infanrix Hexa (رقم الدُفعة A21CD072D).

بالإضافة إلى ذلك ، يتم إجراء فحص خارجي عن طريق هضم الهيموجلوبين ، من أجل التحقق بشكل أكبر من جودة كمية التربسين المستخدمة. تم التعرف على الهيموغلوبين ، الذي تم تحليله في قسم التحليل الذي تمت فيه مراقبة المنتج ، بدرجة إحصائية كبيرة (سجل <-100). سمحت هذه البيانات لتأكيد وجود نشاط الإنزيم.

2.2 تحليلات جديدة تتعلق بمنتجات Hexyon و Gardasil

أدى تحليل منتجات Hexyon و Gardasil 9 إلى اكتشاف الملامح الجزيئية المعقدة. في هذه الحالة ، ومع ذلك ، تم الكشف عن وجود معظم المستضدات المبلغ عنها في النشرة. تم اكتشافها عن طريق التشغيل عن طريق الهضم التربتي وبحضور المواد المساعدة. هذه الحقيقة تعزز كذلك الدليل على أن تفاعل الهضم التريبتي لا يتم تثبيته في وجود المواد المساعدة.

في حالة لقاح Hexyon و Gardasil 9 ، يُعزى تعقيد المظهر الجانبي الجزيئي بشكل أساسي إلى وجود العديد من الأنواع ، ذات الوزن الجزيئي المنخفض ، والتي لا يمكن التعرف عليها من خلال قواعد البيانات المرجعية لـ Metlin ^1-2 و KEGG ³.

3. الاستنتاجات والاعتبارات النهائية

أدت التحليلات المنجزة إلى الاستنتاج التالي:

1. المظهر الجزيئي للقاحات التي تم تحليلها معقد بشكل عام وغير معروف إلى حد كبير.
2. هناك تلوثات البروتين ، لم يعلن عنها في النشرة ، التي تكوينها متغير.
3. في العديد من الحالات ، لم يتم اكتشاف المستضدات التي تم الإعلان عنها في النشرة. هذه الحقيقة يمكن أن تعزى إلى عدة عوامل. من بين الأخير ، يمكننا النظر في حساسية الطريقة المستخدمة. ومع ذلك ، نشعر أنه يمكننا استبعاد ظاهرة تثبيط الهضم بسبب وجود المواد المساعدة في صياغة اللقاح. في الواقع ، يتم تأكيد النشاط الأنزيمي بشكل رئيسي من خلال وجود شظايا التحلل الذاتي التريبتي ، داخل حلول اللقاحات المهضومة (الرقابة الداخلية).

4. الدراسات المستقبلية

سيتم إجراء المزيد من الدراسات كجزء من أنشطة البحث والتطوير التي تهدف إلى استكشاف الجوانب التالية:

1. التركيب الجزيئي المرتبط بالبقايا الصلبة الموجودة في اللقاحات (تحليل MALDI TOF MS) ؛ ⁵
2. تقييم تركيز المعادن الموجودة في المنتجات.
3. تحليل المستوى الثاني لتأكيد وجود المركبات السامة المكتشفة في مرحلة الفحص. وبالتالي فإن تركيزها سوف يرتبط بسمية هذه المواد بناءً على ما هو مذكور في أوراق بيانات السلامة الدولية. سيتم إجراء تحليلات المستوى الثاني وفقًا للتوجيه الأوروبي EU / 2002/657 / EC المفيد لضمان معايير الجودة العالية في قطاع قياس الطيف الكتلي. ⁶

في الإيمان
d.ssa لوريتا بولجان

5. المراجع الببليوغرافية

1. Autenhahn R، Cho K، Uritboonthai W، Zhu Z، Patti G، Siuzdak G (September 2012). "سير عمل متسارع للأيضات غير المستهدفة باستخدام قاعدة بيانات METLIN". الطبيعة التكنولوجيا الحيوية. 30: 826-828. دوى: 10.1038 / nbt.2348. PMC 3666346. PMID 22965049.
2. Smith CA، I'Maille G، Want EJ، Qin C، Trauger SA، Brandon TR، Custodio DE، Abagyan R، Siuzdak G (December 2005). "METLIN: قاعدة بيانات طيفية للكتلة الأيضية" (PDF). هناك المخدرات مونيت. 27 (6): 747-51. دوى: 10.1097 / 01.ftd.0000179845.53213.39. بميد 16404815.
3. Kanehisa M (2013). "التطور الكيميائي والجيني لشبكات التفاعل المحفزة بالإنزيم". FEBS Lett. 587 (17): 2731–7.
4. Cristoni S، Bernardi LR. "المعلوماتية الحيوية في تحليل بيانات الطيف الكتلي لدراسات البروتينات". خبير Rev Proteomics. 2004 ديسمبر ؛ 1 (4): 469-83.
5. كريستوني إس ، برناردي إل آر. "تطوير منهجيات جديدة لدراسة قياس الطيف الكتلي للجزيئات الحيوية العضوية." ماس سبيكتروم القس .2003 نوفمبر - ديسمبر ؛ 22 (6): 369-406.
6. Cristoni S، Dusi G، Brambilla P، Albini A، Conti M، Brambilla M، Bruno A، Di Gaudio F، Ferlin L، Tazzari V، Mengozzi S، Barera S، Sialer C، Trenti T، Cantu M، Rossi Bernardi L، نونان دي إم. "SANIST: تحسين تقنية للتعرف على المركب استنادًا إلى توجيه الاتحاد الأوروبي مع تطبيقات في تحليلات الطب الشرعي والأدوية والغذائية." J. قداس الطيف. 2017 يناير ؛ 52 (1): 16-21. دوى: 10.1002 / jms.3895.

تنزيل: CORVELVA-تقرير-تقنية Finale.pdf