الرد الفني على انتقادات الدكتور بوتشي
نورد أدناه استجابة فنية للدكتور لوريتا بولجان للنقد الذي نشره الدكتور بوتشي على تحليلات كورفيلفا.
عزيزي الدكتور بوتشي،
أدناه ، أرد على المشكلات الحرجة التي أثرتها بشكل خاص في مقالك المنشور على: العلماء السيئون
بادئ ذي بدء ، أود أن أوضح لك أن استخدام تقنيات NGS / HTS (تسلسل الجيل التالي أو التسلسل عالي الإنتاجية) ليس أصليًا على ركائز معقدة من أصل التكنولوجيا الحيوية ، مثل اللقاحات.
تم استخدام تقنية NGS بالفعل في منتجات اللقاحات ، على سبيل المثال:
- في تحليل دفعات تجارية من لقاح فيروس الروتا (Victoria JG، Wang C، Jones MS، Jaing C، McLoughlin K، Gardner S، et al. الأحماض النووية الفيروسية في اللقاحات الحية الموهنة: اكتشاف متغيرات الأقليات وفيروس مغامر. J Virol 2010؛ 84: 6033–40) السماح بالحظر اللاحق لتسويق الكثير الملوثة بنوع Porcine Circovirus 1 (PCV1) ، على الرغم من أنه سبق اجتياز جميع الاختبارات المطلوبة للتطوير والتجارب السريرية والإنتاج (Dubin، G.؛ Toussaint، JF؛ Cassart، JP؛ Howe، B.؛ Boyce، D.؛ Friedland، L.؛ Abu-Elyazeed، R.؛ Poncelet، S.؛ Han، HH؛ Debrus، S. 1 تلوث لقاح فيروس الروتا البشري ، Rotarix: النهج والنتائج ، اللقاحات Hum. Immunother ، 2013 ، 9 ، 2398-2408).
- في الكشف عن فيروس Rhabdovirus الجديد في خط الخلية Sf9 (MH ، Galvin TA ، Glasner DR ، Shaheduzzaman S ، Khan AS. التعرف على فيروس rhabdovirus الجديد في خطوط الخلايا Spodoptera frugiperda. J Virol 2014؛ 88: 6576–85)
- في التعرف على فيروس لقاح النكاف في دماغ طفل يعاني من نقص المناعة وتوفي من التهاب الدماغ (Morfopoulou S، Mee ET، Connaughton SM، Brown JR، Gilmour K، Chong WK، Duprex WP، Ferguson D، Hubank M، Hutchinson C، Kaliakatsos M، McQuaid S، Paine S، Plagnol V، Ruis C، Virasami A، Zhan H، Jacques TS، Schepelmann S، Qasim W، Breuer J. Sequences Deep يكشف استمرار فيروس لقاح النكاف المرتبطة بالخلايا في التهاب الدماغ المزمن Acta Neuropathol. 2017 Jan؛ 133 (1): 139-147. Doi: 10.1007 / s00401- 016-1629-y Epub 2016 October 21. PubMed PMID: 27770235).
أيضًا في العمل التعاوني لعام 2017 "دراسة متعددة المراكز لتقييم أداء التسلسل عالي الإنتاجية لاكتشاف الفيروسات" (A Khan AS ، Ng SHS ، Vandeputte O ، Aljanahi A ، Deyati A ، Cassart JP ، Charlebois RL ، Taliaferro LP. دراسة متعددة المراكز لتقييم أداء التسلسل عالي الإنتاجية لاكتشاف الفيروسات. MSphere. 2017 سبتمبر 13 ؛ 2 (5) .pii: e00307-17. Doi: 10.1128 / mSphere.00307-17. ECollection 2017 سبتمبر-أكتوبر. PubMed PMID : 28932815 ؛ PubMed Central PMCID: PMC5597969) ، تم تمييزه حيث أظهرت التحليلات التي أجريت باستخدام أدوات HTS المختلفة ، مع بروتوكولات مختلفة لإعداد العينات وتحليل البيانات ، على العينات التي تحاكي المواد البيولوجية المعقدة ، حساسية مماثلة في اكتشاف الفيروسات في 3 عدة ورش عمل.
أخيرًا ، في "تقرير المؤتمر الدولي حول تسلسل الجيل التالي للكشف عن الفيروسات العنيفة في المستحضرات البيولوجية" (خان AS ، Benetti L ، Blumel J ، Deforce D ، Egan WM ، Knezevic I ، Krause PR ، Mallet L ، Mayet D ، Minor PD ، نيلز ، وانج ج. تقرير المؤتمر الدولي حول تسلسل الجيل القادم للكشف عن الفيروسات العنيفة في المواد البيولوجية ، البيولوجية ، 2018 سبتمبر ؛ 55: 1-16. دوي: 10.1016 / j.biologicals.2018.08.002. PubMed PMID: 2018) ، تقرير عن مؤتمر دولي عقد في روكفيل (MD) في الفترة من 6 إلى 30093175 أكتوبر 26 ، اشترك في تنظيمه IABS (التحالف الدولي للتوحيد البيولوجي) وإدارة الأغذية والأدوية FDA (إدارة الغذاء والدواء الأمريكية) ، في حضره مائة وثمانية وعشرون عالمًا من 27 دولة مختلفة ، بما في ذلك الباحثون جلاكسو سميث كلاين وميرك وسانوفي ، وذكر أن:
تتمثل المزايا الرئيسية لنظام NGS في اختبارات الأمان للكشف عن الفيروسات في النهج السريع وغير المستهدف ، والذي يمكن استخدامه في ركائز متعددة والذي يسمح باكتشاف مجموعة واسعة من الفيروسات ، بما في ذلك المتغيرات والأنواع الجديدة. . وليس هناك حاجة لتضخيم محدد ، في حين يتطلب PCR استهداف تسلسل محدد "
وبعد:
"تكشف تقنيات HTS عن بعض القيود الحالية للبرامج لاختبار المواد البيولوجية ويمكن دمج الفجوات في هذه البرامج وزيادة سلامة المنتج"
وفي استنتاجات التقرير نقرأ:
"الجهود التعاونية والعلمية المستمرة والتبادلات بين الهيئات التنظيمية والهيئات العامة الأخرى والصناعة والمختبرات الأكاديمية ومقدمي الخدمات ستعمل على تعزيز مجال NGS بهدف ضمان سلامة المنتجات العضوية التي تؤثر على صحة الإنسان والحيوان"
أجب أدناه على ملاحظاتك ، لا سيما تلك التي تسمح لنا بتوضيح البيانات الأولية التي قمنا بإنتاجها بشكل أفضل في بعض أجزاء Preixix Tetra.
ملاحظة 1
"يتساءل المرء كيف يمكن التوفيق بين ممارسة السرية هذه ، على عكس أي معيار لتبادل البيانات ، مع الطلبات المستمرة للشفافية المقدمة من جمعية CORVELVA ورئيس الهيئة الوطنية لعلماء الأحياء من حيث سلامة اللقاحات: إنها قانونية إطلاق إنذار ، دون توفير جميع البيانات اللازمة لتقييم الاتساق؟
كيف يمكن للمجتمع العلمي والمواطنين تقييم ثقل بعض المطالبات ، إذا كانت البيانات الأصلية الكاملة سرية ، في انتظار المدعي العام لاتخاذ قرار بشأن ما إذا كان وكيفية المضي قدما في دعوى قضائية؟ "
الإجابة 1
كانت بيانات الميتاجينوميات التي كشف عنها كورفيلفا عن لقاح بريريكس تيترا (لقاح MPRV) والتي تمت مناقشتها في التقرير المنشور في ديسمبر / كانون الأول أولية (تم الكشف عن نسخة محدثة على موقع كورفيلفا في 23 يناير ، كنتيجة لخطوة أخرى في تحليل البيانات) ، لأنه ، كما تم التأكيد عليه بالفعل في عدة مناسبات ، فإن البيانات التي تم الكشف عنها ناتجة حتى الآن عن عملية البحث والتطوير التكنولوجي التي بدأت في عام 2017 ، بهدف صقل وتحسين الإجراء بأكمله ، من معالجة العينة إلى تحليل المعلوماتية الحيوية. تقرر الكشف عن النتائج أثناء العمل ، عند توفرها ، بشفافية مطلقة (على عكس ما أعلنته أنت على أنه "ممارسة للسرية"!) وعلى أي حال ، تدعمها بشدة الأدبيات العلمية حول حجة.
في رأينا ، ما كشفناه حتى الآن عن هذا اللقاح ، خاصة فيما يتعلق بكمية الحمض النووي الجنينية البشرية ، ليس شيئًا جديدًا أو غير متوقع ، والأهم من ذلك كله غير معروف لشركات الأدوية.
ملاحظة 2
"يمكن بسهولة ملاحظة أن إجمالي القراءات المشار إليها في أعلى اليسار (المظللة باللون الأصفر) يزيد عن 6 ملايين ؛ ومع ذلك ، فإن مجموع جميع القراءات مقسوما على فئة الكائن الحي هو ما يقرب من 5 ملايين ونصف المليون ، مع "نقص" أكثر من 700.000 قراءة (ومبلغ المئوية ، المشار إليها في المربع الأحمر ، أي ما يعادل 88 ٪). هذه الإضافة البسيطة ، المكررة في جميع الجداول ، تطرح سؤالًا عن المكان الذي انتهت به القراءات المفقودة (نسبة لا تذكر بالتأكيد) ولماذا لم يتم الإبلاغ عنها. احتمال أن يكون الباحثون قد ارتكبوا خطأ ما زال مفتوحًا بوضوح "
الإجابة 2
دعنا نقول أن 700.000 يقرأ بشكل أو بآخر تغيير جوهري في تحليلات الفحص الأولي التي أجريت. يتم تضمين تسلسلات مفقودة في حساب التسلسلات "غير المعينة". كما ذكرنا سابقًا ، فإن البيانات ليست نهائية وقد تكون هناك أخطاء في التقارير. سيتم مراجعة كل شيء وتصحيحه مع تقدم العمل.
ملاحظة 3
"جينوم فيروس الحصبة الألمانية ، أحد الفيروسات الموهنة اللازمة لمنح المناعة ، لن يكون موجودًا. لا يعتمد الاكتشاف عند مستويات منخفضة جدًا ، في حدود الضوضاء الإحصائية ، لكائن دقيق في العينة قيد الفحص على عدم وجوده ، بل على طريقة تحديد غير محسّنة. يمكن مواجهة نفس الصعوبة المتطابقة لتحديد أي جينوم آخر ، لم يتم معايرة طريقة التحليل بشكل مناسب ؛ وبالتالي ، يُعزى الفشل في الكشف عن جينوم فيروس الحصبة الألمانية (علاوة على فيروس أحادي الخيط مغلف) إلى الطريقة المستخدمة ، دون الحاجة إلى التذرع بغيابه في كميات اللقاح التي تم فحصها "
الإجابة 3
أطروحته مقبولة. نحن في مرحلة البحث والتطوير ، ولكن التكنولوجيا قوية للغاية ومعترف بها من قبل المجتمع العلمي الذي يتعامل مع التسلسل العميق للكشف عن الفيروسات في الركائز البيولوجية المعقدة. سوف تسمح لنا الاختبارات بين المختبرات وإدخال معايير مناسبة للمزيج الفيروسي المعتمد بالتحقق من صحة الفرضية التي اقترحتها أو دحضها ، أي أن الطريقة لم يتم تحسينها (بعد) للفيروسات.
على أي حال ، تم العثور على جينوم الحصبة الألمانية في الدفعة قيد الفحص ، مما زاد من عمق التسلسل (114 متواليات نهاية زوجية 125bp ، من حوالي 260 مليون تسلسل تم إنتاجها) كما هو موضح في التقرير الثاني الصادر في يناير 2019. أيضًا في اللقاح تم اكتشاف MMRVax Pro من شركة Merck ، والذي تم تحليله في عام 2017 بنفس الطريقة ، في جينوم فيروس الحصبة الألمانية دون الحاجة إلى الذهاب إلى هذه الأعماق العميقة ، مما يثبت أن هذه الطريقة فعالة.
ملاحظة 4
“سيتم اكتشاف جينومات العديد من الكائنات الملوثة التي تنتمي إلى العديد من الأصناف ، بما في ذلك الديدان الطفيلية والبكتيريا والفيروسات المسببة للأمراض البشرية. هناك أيضًا مشكلة أخرى في الجداول المقدمة ، والتي تتألف من التردد الوفير للتسلسل الذي يعزى إلى الفيروسات المدمجة في الجينوم البشري (الفيروسات الداخلية ذات الطبيعة المختلفة) أو تسلسلات الفيروسات القهقرية المعروفة التي توجد في الجينوم البشري العادي (هذه هي الحالة ، على سبيل المثال ، المتواليات الارتجاع العكسي المتكامل الذي يمكن أن يخطئ في الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية) أو في جينوم الخلايا الجنينية للدجاج المستخدمة لإنتاج اللقاحات ، عادةً ما يتم العثور عليها كواجبات زائفة لتلوث الجينوم في تسلسل الحمض النووي الريبي أو الحمض النووي الريبي اعتمادًا على التأخير المحدد في الاعتبار. بادئ ذي بدء ، هناك العديد من الأنواع المدرجة في جداول التقارير ، والتي توجد على أساس عدد من القراءات المدرجة بالكامل في الضوضاء الإحصائية. 3 قراءات أو أقل هي إجراء محفوف بالمخاطر يؤدي إلى عدد كبير من الإيجابيات الخاطئة "
الإجابة 4
تم تحديث إصدار التقرير الذي تم الكشف عنه على موقع الويب Corvelva في ديسمبر ، والذي تشير إليه ، مؤخرًا بإصدار تم فيه التحقق من صحة جزء من الملوثات مسبقًا باستخدام برنامج بديل ، ثم يدويًا. تم إجراء التحليل الأول عمداً بدون مرشحات لتسليط الضوء على كل إشارة ممكنة وجميع المشاكل المتعلقة بالتحليل "المفتوح". ليس الغرض من عملنا ، كما تم التأكيد مرارًا وتكرارًا ، إجراء تحليل لإصدار الدُفعات ، بل إجراء فحص أولي ، وبعد ذلك تأكيد بين المختبرات حول القضايا الحرجة التي ظهرت ، من خلال استخدام تقنية راسخة في هذا المجال. الجينوم ، مطبق بالفعل على اللقاحات وسيقوم أيضًا بتقديمه من قِبل الهيئات التنظيمية وشركات الأدوية الكبرى لزيادة جودة المنتج وبالتالي سلامة المنتج.
إذا قمت بتحديد الحد المسموح به وهو 3 قراءات (بناءً على ماذا؟) ، فبإمكاننا على الأقل التفكير في وجود علامات على وجود فيروسات قهقرية داخلية المنشأ في هذا اللقاح (قراءات بشرية من Retrovirus K: 32 من 125bp ، تتوافق مع 4000bp و HERVH- يقرأ env 62: 4 ، أي ما يعادل 500 نقطة أساس) ، في بيانات RNA-seq ، والتي تمثل بحكم تعريفها المادة المنقولة وبالتالي من المحتمل أن تكون نشطة.
بدلاً من ذلك ، أتفق معك على أن تسلسلات الفيروسات القهقرية الموجودة في بيانات DNA-seq يمكن أن تكون فيروسات مدمجة في الجينوم البشري ، بالنظر إلى كمية الحمض النووي عالية جدًا في اللقاح المعني.
أتذكر أنه في لقاح Attenuvax (لقاح الحصبة) ، أربعة متواليات تغطي 4 نقطة أساس (Victoria JG ، Wang C ، Jones MS ، Jaing C ، McLoughlin K ، Gardner S ، et al. الأحماض النووية الفيروسية في اللقاحات الموهنة الحية: اكتشاف المتغيرات الأقلية والفيروس المغامر - J Virol 700؛ 2010: 84–6033) سمح للكشف بواسطة NGS عن تلوث فيروس أنفلونزا الطيور (ALV) لأول مرة في لقاح ، ثم تم تأكيده بواسطة PCR المتداخل.
ملاحظة 5
"فيما يتعلق بأول هذه الملوثات المحتملة ، بكتريا تثبيت النتروجين غير الممرضة Bradyrhizobium ،" ظهورها "في مختبرات التسلسل ومن المعروف أنها مشكلة تتعلق بإعداد العينات التي سيتم تسلسلها، التي تعزى إلى تلوث مجموعات تنقية الحمض النووي والماء والكواشف لاستخدامها. هناك مشكلة معروفة ، والتي في عمل الجينوم "الاستكشافي" ، تسلسل عينة تحكم ، على سبيل المثال تحتوي على الماء ، بالتوازي مع العينة قيد الفحص "
الإجابة 5
تم صنع البيض (سواء من الاستخراج أو من المكتبة) ، لكن لم يتم الحصول على المكتبات وبالتالي لم يكن من الممكن تشغيلها على جهاز التسلسل للتحقق من ماهية التلوث الكاشف / البيئي بالتحديد. ومع ذلك تُبذل جهود لمحاولة فهم الملوثات "الفسيولوجية" وستساعد الاختبارات بين المختبرات أيضًا في تحديد الملوثات البكتيرية المعتمدة على المختبرات.
ملاحظة 6
"فيما يتعلق بنوعين من الديدان التي كشف عنها تحليل تسلسل الحمض النووي الريبي ، يكفي أن نلاحظ كيف أنها غير موجودة في تحليلات تسلسل الحمض النووي المقابلة ، حيث ينبغي اكتشافها بشكل أفضل ؛ وبالتالي ، فإن الوجود الفعلي للنوعين يظهر كقطعة أثرية ، والتي لا يمكن تأكيدها في ضوء نفس بيانات تسلسل الحمض النووي المقدمة.
في ضوء الاعتبارات المقدمة ، فإنه من غير الممكن تأكيد وجود أي من الجينوم الملوث المُبلغ عنها ، وهناك أدلة قوية تقودنا إلى التفكير في وجود العديد من الإيجابيات الخاطئة "
الإجابة 6
يوفر الإصدار الثاني من التقرير بالفعل التحقق الأول من بعض الكائنات الحية ، مع برنامج بديل ، ويدويًا.
يتم استخدام تقييم السمات غير الصحيحة لبرنامج Kraken (علاوة على ذلك أحد البرامج الأكثر استخدامًا من قِبل المجتمع العلمي لتحليلات الجينوم كامل الجينوم) لتطوير خط أنابيب معلوماتية حيوية مخصص لهذا النوع من التحليل ، والذي لا يتطلب استخدام برامج أخرى. البرمجيات والتفتيش اليدوي (علاوة على ذلك شائع في مجال الميتاجينيات لمعرفة أحدث المشكلات بسبب عدم وجود قواعد بيانات محددة ودقيقة بشكل خاص).
ملاحظة 7
"الحمض النووي البشري المكتشف سيكون ذا وزن جزيئي مرتفع وتغطية الجينوم البشري ستكون كاملة ، بحيث يكون الجينوم بأكمله من خلايا الجنين البشري وليس أجزاء منه موجودًا في الكثير من اللقاحات التي تم فحصها.
"في لقاح Priorix Tetra ، يكون الحمض النووي الجيني البشري ذو وزن جزيئي مرتفع (> 10.000 نقطة في البوصة) والتغطية التسلسلية الكلية للجينوم البشري المرجعي بأكمله (HG-19) تُظهر أنه الجينوم الكامل للخلايا الجنينية المستخدمة في يجب أن تكون ثقافة فيروس اللقاح موجودة وليس أجزاء منها فقط. "
لم يتم تقديم دليل مباشر على البيان المذكور ، دون المساس بوجود الحمض النووي الذي يزن حوالي 100.000 قاعدة التي كشف عنها المؤلفون الكهربائيون الهلام من قبل المؤلفين (تم توثيقه برقم جودة رديء في وثيقة CORVELVA ، والتي من المستحسن الحصول على نسخة أصلية عالية قرار لتقييم ما إذا كان يتم تقديم البيانات بطريقة سليمة).
ومع ذلك ، ينسى المؤلفون أن الحمض النووي لبعض الفيروسات المخففة الموجودة في اللقاح المعني هو بنفس حجم ما كشفوه في الجل (على سبيل المثال ، الحمض النووي لفيروس جدري الماء هو 125 كيلو بايت) ؛ لذلك ، حتى إذا كنت تريد التعرف على آثار الحمض النووي عالي الوزن في صورة الهلام المقدمة ، يمكن أن يعزى هذا بوضوح إلى الحمض النووي للفيروسات المخففة الموجودة في اللقاح ، وليس لشظايا الحمض النووي البشري. مرة أخرى ، نحن نواجه تفسيرًا مفرطًا للنتيجة التجريبية. بالنسبة للعنصر الثاني الذي تستند إليه مطالبة CORVELVA ، وهو أن الجينوم البشري بأكمله سيكون موجودًا في اللقاحات ، فإننا نتذكر أنه ليست هناك حاجة حتى للوصول إلى بيانات التغطية التفصيلية لوزن الاتساق: عمق التسلسل المستخدم ومع عدد القراءات التي تم الحصول عليها ، هذا البيان غير ممكن بالمرة. علاوة على ذلك ، فإن تقنية التسلسل المستخدمة ، بناءً على تسلسلات قصيرة ، 125 نيوكليوتيدات ، لا تسمح بتحديد ما إذا كانت الجينوم مجزأة. تقنية التسلسل المستخدمة فقط تسمح بتقدير جزء من الحمض النووي الجيني المتسلسل "
الإجابة 7
الحمض النووي البشري في هذا اللقاح هو حوالي 8 إلى 1 نسبة إلى الحمض النووي جدري الماء (88 ٪ من القراءات هي من أصل إنساني ، مقارنة مع 11 ٪ من جدري الماء في الدفعة الأخيرة التي تم تحليلها A71CB256A). لا توجد فيروسات dsDNA المخففة الأخرى في اللقاح لأن فيروسات الحصبة والنكاف والحصبة الألمانية عبارة عن فيروسات RNA مفردة السلاسل لا يمكن عرضها على جل الاغاروز. NGS عبارة عن تقنية كمية ، وبالتالي فإن القياس الكمي البسيط الفلوري لمجموع الحمض النووي المستخلص من اللقاح (على سبيل المثال ، A71CB256A = 3,7 ميكروغرام لكل جرعة) ، المرتبطة بالنظر في التقدير الكمي النسبي المذكور أعلاه (8: 1) ، يسمح لنا لتكون قادرة على القول أن الحمض النووي الخلوي حوالي 2,9 ميكروغرام لكل جرعة ، مقارنة بنحو 0.74 ميكروغرام من الحمض النووي جدري الماء. لذلك من المعقول أن جزءًا على الأقل من الحمض النووي ذي الوزن الجزيئي المرتفع على الجل قد يكون جزءًا من خلايا خلية الجنين MRC5.
إن الدليل المباشر على وجود جينوم بشري كامل داخل هذا المنتج (على سبيل المثال مع جينات وتسلسلات غير مشفرة) ، مجزأ أو غير مجزأ ، ناتج عن محاذاة القراءات المشتقة من الإنسان على المرجع البشري hg19.
يوضح الجدول التالي ، المميز باللون البرتقالي ، النتيجة المعبر عنها في "Av_cov = متوسط التغطية" لمحاذاة التسلسلات البشرية للدفعات الثلاث من Priorix التي تم اختبارها (الدفعة الأولى والثانية والثالثة) على الكروموسومات البشرية. في العمود 3 ، chrM عبارة عن DNA ميتوكوندريا ، بينما Chr1 إلى ChrY هي الكروموسومات البشرية المُجمَّعة ، بما في ذلك الكروموسومات الجنسية X و Y. يُظهر العمود 2 طول الكروموسومات البشرية المُجمَّعة معبرًا عنها في أزواج قاعدية.
التغطية منخفضة (متوسط \ u1b \ u2b \ u3b \ u16b على طول كل كروموسوم <من 5x) ولكن تجانس توزيع القراءات التي تتماشى بشكل فريد ، على طول جميع الكروموسومات البشرية ووجود قراءات أيضًا تتوافق مع تغطية أعلى للجينوم الميتوكوندريا (في الخلايا البشرية يوجد جينومان ، أحدهما نووي حوالي 4 جيجا بايت كبير وينقسم إلى كروموسومات وواحد أصغر ، دائري ، حوالي 1 كيلو بايت من الميتوكوندريا) ، ومع ذلك ، يسمح لنا بالتعرف بلا منازع على موقف مشابه لتسلسل الجينوم المنخفض تمرير الجينوم البشري فرد. من أجل فهم أسهل لما هو مذكور ، في الجزء المشار إليه باللون الأخضر ، يوجد تسلسل كامل للجينوم البشري منخفض المرور (3 عينات ، XNUMX إناث و XNUMX ذكر) على عمق مشابه لذلك الذي تم إنتاجه في مجموعات اللقاح الثلاثة من Priorix Tetra.
يمكن أيضًا استنتاج إشارة إلى جنس الفرد (على الأرجح الذكور) في اللقاح من العلاقة بين متوسط تغطية كروموسوم X و Y.
تم تصنيف الحمض النووي البشري الموجود في الكثير من التسلسل السابق من Priorix أيضًا على أنه ينتمي إلى خط الجنين MRC-5 ، وهو خط الخلية المستمر من أنسجة الرئة لجنين مجهض من الستينيات ، حيث فيروس جدري الماء والحصبة الألمانية. يوضح تحليل متغيرات الحمض النووي للميتوكوندريا الموجود في اللقاح مقارنةً بالحمض النووي للميتوكوندريا لخط MRC-60 (تم شراء الحمض النووي لخط الخلية من ATCC ، المورد الرئيسي للمواد البيولوجية القياسية في العالم) أنها نفس الشخص.
ملاحظة 8
"لقد كان هناك منذ فترة طويلة دليل على أن جرعات عالية للغاية من الحمض النووي البشري لا يمكن أن تسبب مخاطر كبيرة حتى خلال فترات المراقبة الطويلة ، كما تؤكد ذلك دراسات على الرئيسيات غير البشرية، من الخبرة السريرية مع اللقاحات والأدوية البيولوجية الأخرى ومن دراسات حديثة لتقييم المخاطر التي تشير إلى أنه حتى في البلدان غير الأوروبية التي توجد فيها عتبات لمقدار الحمض النووي عن طريق الحقن ، فإن هذه العتبات صارمة بشكل غير ضروري "
الإجابة 8
مقالة 1995https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S104510568570036X?via%3Dihub) التي ذكرتها أنت ، تتعلق بدراسة على الرئيسات ، والتي هي في رأيي بالتأكيد غير كافية لإثبات عدم وجود العدوى ، والأورام الخلقية والحصانة الذاتية للحمض النووي البشري المحقون في الأطفال ، كما ذكر نفس المؤلفون في الجزء الأخير من المناقشة. في التجربة ، يتم حقن كمية كبيرة من الحمض النووي البشري في القرود ، وبالتالي لا يتم حقن الحمض النووي من نفس النوع.
استشهد المادة الثانية (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23569076) تنص بوضوح شديد على أن الحمض النووي المتبقي معدي عند 2 ميكروغرام ، حتى لو تم الحصول على هذا الحد في أي حال من الأحوال من تقييم إحصائي وليس من البيانات التجريبية. على أي حال ، وفقًا لمؤشرات المؤلف ، سيكون لقاح Priorix كمية من الحمض النووي الجنيني يتماشى بوضوح مع تلك التي تم تحديدها في خطر الإصابة بالأمراض المعدية.
تعلن شركة Merck الخاصة بلقاح Varivax (جدري الماء ، الفيروس الموهن الحي) في النشرة الأمريكية عن وجود الحمض النووي للجنين البشري المستمدة من خلايا MRC-5 والتي ، من التحليلات التي أجراها الدكتور Deisher ، يبدو أنها في حوالي 2 ميكروغرام.
في حالة النشرة الإيطالية لـ Priorix Tetra ، لا يُشار إلى وجود الحمض النووي لخط MRC-5 ، على الرغم من كونه بكميات من نفس الحجم من حيث الحجم الموجود في American Varivax. في أي حال ، فإن 2 ميكروغرام من الحمض النووي الجنيني لـ MRC-5 ليس في رأيي كمية متبقية ، ولكنه مكون حقيقي من اللقاح.
أظهرت الدراسات المختبرية التي أجراها الدكتور ديشر ، والتي نأمل أن يتم نشرها قريبًا ، نتائج محزنة عندما يتم تحضين لقاح يحتوي على الحمض النووي البشري الجنيني (ناقص الميثيل) في المختبر مع خلايا جذعية المكونة للدم البشرية. لكننا ننتظر نشر البحث ومن ثم يمكننا الاجتماع مرة أخرى حول هذا الموضوع.
لوريتا بولجان *
* دكتوراه في علوم الكيمياء والتقنيات الصيدلانية ، وشهادة الدكتوراه في العلوم الصيدلية من كلية الطب بجامعة هارفارد في بوسطن. عملت في قطاع الصناعة الدوائية حيث تعاملت مع تسجيل وتطوير المشاريع البحثية في مجال الأورام. شارك استشاري جزء من القانون 210/92 ، التلوث البيئي والأمراض المهنية ، في آخر لجنة تحقيق برلمانية حول اليورانيوم المنضب في مجموعة اللقاحات. استشاري حاليًا في الرتبة الوطنية لعلماء الأحياء لسمية الأدوية واللقاحات ، كما يتناول التغذية والعلاجات التكميلية.
تنزيل: CORVELVA-d.ssa-لوريتا-Bolgan يستقبل واحد في Bucci.pdf