Technische Antwort auf die Kritik von Dr. Bucci

Technische Antwort auf die Kritik von Dr. Bucci

Wir berichten im Folgenden über die technische Antwort von Dr. Loretta Bolgan auf die Kritik von Dr. Bucci an Corvelva-Analysen.


Lieber Dr. Bucci,

Ich antworte auf die kritischen Fragen, die Sie insbesondere in Ihrem Artikel angesprochen haben, der veröffentlicht wurde am: CattiviScienziati.com

Zunächst möchte ich Sie darauf hinweisen, dass die Verwendung von NGS / HTS-Technologien (Next Generation Sequencing oder High-Throughput Sequencing) NICHT original ist auf komplexen Substraten biotechnologischen Ursprungs wie Impfstoffen.

Die NGS-Technologie wurde bereits in Impfstoffen eingesetzt, zum Beispiel:

  • bei der Analyse von kommerziellen Chargen des Rotavirus-Impfstoffs (Victoria JG, Wang C., Jones MS, Jaing C., McLoughlin K., Gardner S., et al., Virale Nukleinsäuren in abgeschwächten Lebendimpfstoffen: Nachweis von Minderheitenvarianten und eines zufälligen Virus. J Virol 2010; 84: 6033–40) Ermöglichen der anschließenden Sperrung des Inverkehrbringens von Partien, die mit Schweine-Circovirus Typ 1 (PCV1) kontaminiert sind, obwohl sie zuvor alle für die Entwicklung, klinische Versuche und Produktion erforderlichen Tests bestanden haben (Dubin, G.; Toussaint, JF; Cassart, JP, Howe, B., Boyce, D., Friedland, L., Abu-Elyazeed, R., Poncelet, S., Han, HH, Debrus, S. Untersuchung einer behördlichen Untersuchung zum potenziellen Circovirus-Typ von Schweinen 1 Kontamination des humanen Rotavirus-Impfstoffs Rotarix: Ansatz und Ergebnis Hum. Vaccines Immunother. 2013, 9, 2398–2408).

  • beim Nachweis eines neuen Rhabdovirus in der Sf9-Zelllinie (MH, Galvin TA, Glasner DR, Shaheduzzaman S., Khan AS. Identifizierung eines neuen Rhabdovirus in Spodoptera frugiperda-Zelllinien. J Virol 2014; 88: 6576–85)

  • bei der Identifizierung des Mumps-Impfvirus im Gehirn eines immungeschwächten Kindes, das an Enzephalitis gestorben ist (Morfopoulou S, Mee ET, Connaughton SM, Brown JR H. Jacques TS, S. Schepelmann, W. Qasim, J. Breuer. Deep Sequencing zeigt die Persistenz des zellassoziierten Mumps-Impfvirus bei chronischer Enzephalitis. Acta Neuropathol. 2017 Jan; 133 (1): 139-147. Doi: 10.1007 / s00401- 016-1629-y., Epub, 2016. Oktober 21. PubMed PMID: 27770235).

Ebenfalls in der gemeinsamen Arbeit von 2017 "Eine multizentrische Studie zur Bewertung der Leistung der Hochdurchsatzsequenzierung für die Viruserkennung" (A Khan AS, Ng SHS, Vandeputte O, Aljanahi A, Deyati A, Cassart JP, Charlebois RL, Taliaferro LP. A. Multizentrische Studie zur Bewertung der Leistung der Hochdurchsatzsequenzierung für die Viruserkennung. MSphere. 2017 Sep 13; 2 (5) .pii: e00307-17. Doi: 10.1128 / mSphere.00307-17. ECollection 2017 Sep-Okt. PubMed PMID : 28932815; PubMed Central PMCID: PMC5597969) wird hervorgehoben, da Analysen, die mit verschiedenen HTS-Instrumenten mit unterschiedlichen Protokollen zur Probenvorbereitung und Datenanalyse an Proben durchgeführt wurden, die komplexe biologische Materialien imitieren, eine ähnliche Empfindlichkeit beim Nachweis von Viren in 3 gezeigt haben mehrere Workshops.

Im Bericht der internationalen Konferenz zur Sequenzierung der nächsten Generation für den zufälligen Virusnachweis in biologischen Substanzen (Khan AS, Benetti L., Blumel J., Deforce D., Egan WM, Knezevic I., Krause PR, Mallet L., Mayet D., Minor PD , Neels P, Wang G. Bericht über die internationale Konferenz zur Sequenzierung der nächsten Generation für den zufälligen Virusnachweis in biologischen Substanzen. Biologicals. 2018 Sep; 55: 1-16. Doi: 10.1016 / j.biologicals.2018.08.002. Epub 2018 Aug 6 PubMed PMID: 30093175), Bericht über eine internationale Konferenz, die vom 26. bis 27. Oktober 2017 in Rockville (MD) stattfand und von der IABS (International Alliance for Biological Standardization) und der FDA (US Food and Drug Administration) gemeinsam organisiert wurde an dem 16 Wissenschaftler aus XNUMX verschiedenen Ländern teilnahmen, darunter die Forscher Glaxo SmithKline, Merck und Sanofi, heißt es:

„Die Hauptvorteile des NGS für Sicherheitstests zum Nachweis von Viren sind der schnelle und nicht zielgerichtete Ansatz, der auf mehreren Substraten angewendet werden kann und den Nachweis einer Vielzahl von Viren, einschließlich Varianten und neuer Arten, ermöglicht. ; und dass es keinen Bedarf für eine spezifische Amplifikation gibt, während die PCR das Targeting einer spezifischen Sequenz erfordert.

Und doch:

"HTS-Technologien decken einige der aktuellen Einschränkungen von Programmen zum Testen von biologischem Material auf und könnten Lücken in diesen Programmen schließen und die Produktsicherheit erhöhen."

Und in den Schlussfolgerungen des Berichts lesen wir:

"Kontinuierliche gemeinsame und wissenschaftliche Anstrengungen, der Austausch zwischen Aufsichtsbehörden und anderen öffentlichen Stellen, der Industrie, akademischen Laboratorien und Dienstleistern werden den Bereich NGS vorantreiben, um die Sicherheit von ökologischen Produkten zu gewährleisten, die sich auf die Gesundheit von Mensch und Tier auswirken."

Ich antworte auf Ihre Anmerkungen, insbesondere auf diejenigen, die es uns ermöglichen, die vorläufigen Daten, die wir für einige Lose von Priorix Tetra erstellt haben, besser zu erläutern.


Bemerkung 1

"Man fragt sich, wie diese Geheimhaltungspraxis, die gegen jedes Kriterium des Datenaustauschs verstößt, mit den ständigen Forderungen der CORVELVA-Vereinigung und des Präsidenten des Nationalen Ordens der Biologen nach Transparenz in Bezug auf die Impfsicherheit in Einklang gebracht werden kann: Sie ist rechtmäßig einen Alarm auslösen, ohne alle Daten bereitzustellen, die zur Bewertung der Konsistenz erforderlich sind?
Wie können die wissenschaftliche Gemeinschaft und die Bürger das Gewicht bestimmter Forderungen einschätzen, wenn die vollständigen Originaldaten geheim gehalten werden, bis ein Staatsanwalt entscheidet, ob und wie eine gerichtliche Klage zu erheben ist? "

Antwort 1

Die von Corvelva für den Priorix Tetra (MPRV-Impfstoff) veröffentlichten und im Dezember veröffentlichten Bericht diskutierten Metagenomikdaten waren vorläufig (eine aktualisierte Version wurde am 23. Januar auf der Corvelva-Website als Ergebnis eines weiteren Schritts der Datenanalyse veröffentlicht). Denn, wie bereits mehrfach bekräftigt, resultieren die bislang veröffentlichten Daten aus einem 2017 begonnenen Forschungs- und Technologieentwicklungsprozess mit dem Ziel, das gesamte Verfahren von der Probenaufbereitung bis zur Bioinformatikanalyse zu optimieren und zu optimieren. Es wurde beschlossen, die Ergebnisse während der Arbeit, sobald sie verfügbar sind, in absoluter Transparenz (genau das Gegenteil von dem, was Sie als "Praxis der Geheimhaltung" deklariert haben!) Zu verbreiten ‚Argument.

Unserer Meinung nach ist das, was wir bisher über diesen Impfstoff veröffentlicht haben, insbesondere in Bezug auf die hohe Menge an menschlicher fötaler DNA, nichts Neues oder Unerwartetes und am allerwenigsten den Pharmaunternehmen unbekannt.


Bemerkung 2

„Es ist leicht zu erkennen, dass die Gesamtzahl der oben links angezeigten Lesevorgänge (gelb hervorgehoben) mehr als 6 Millionen beträgt. Die Summe aller Lesevorgänge, unterteilt nach Organismenklassen, beträgt ungefähr 5 ½ Millionen, mit einem "Fehlbetrag" von über 700.000 Lesevorgängen (und einer prozentualen Summe, angegeben durch das rote Kästchen, entspricht 88%). Diese einfache Hinzufügung, die in allen Tabellen wiederholt wird, wirft die Frage auf, wo die fehlenden Messwerte gelandet sind (ein Prozentsatz, der mit Sicherheit nicht zu vernachlässigen ist) und warum sie nicht gemeldet wurden. Die Möglichkeit, dass die Forscher einen Fehler gemacht haben, bleibt eindeutig offen "

Antwort 2

Nehmen wir an, 700.000 Lesungen verändern die Substanz der durchgeführten vorläufigen Screening-Analysen mehr oder weniger geringfügig. Fehlende Sequenzen werden in die Berechnung der nicht zugewiesenen Sequenzen einbezogen. Wie bereits erwähnt, sind die Daten nicht endgültig und es kann zu Ungenauigkeiten in den Berichten kommen. Im Verlauf der Arbeit wird alles überprüft und korrigiert.


Bemerkung 3

„Das Genom des Rötelnvirus, eines der abgeschwächten Viren, die zur Verleihung der Immunogenität benötigt werden, wäre nicht vorhanden. Der Nachweis eines Mikroorganismus in der untersuchten Probe an der Grenze des statistischen Rauschens in sehr geringen Mengen hängt daher nicht von seiner Abwesenheit ab, sondern von der nicht optimierten Identifizierungsmethode. Dieselbe, identische Schwierigkeit kann bei der Identifizierung eines anderen Genoms auftreten, für das die Analysemethode nicht geeignet kalibriert wurde; Das Versäumnis, das Genom des Rötelnvirus (darüber hinaus eines eingekapselten einzelsträngigen Virus) aufzudecken, ist daher auf die verwendete Methode zurückzuführen, ohne dass die Abwesenheit in den untersuchten Impfstoffchargen geltend gemacht werden muss. "

Antwort 3

Seine These ist akzeptabel. Wir befinden uns in der Forschungs- und Entwicklungsphase, die Technologie ist jedoch sehr robust und von der wissenschaftlichen Gemeinschaft anerkannt, die sich mit Tiefensequenzierung für den Nachweis von Viren in komplexen biologischen Substraten befasst. Mithilfe von Ringversuchen und der Einführung geeigneter zertifizierter Viral-Mix-Standards können wir die von Ihnen vorgeschlagene Hypothese überprüfen oder widerlegen, dh, dass die Methode (noch) nicht für Viren optimiert ist.

In jedem Fall wurde dann das Rötelngenom in der untersuchten Charge gefunden, wodurch die Sequenzierungstiefe (114 Sequenzen mit gepaarten Enden, 125 bp lang, von etwa 260 Millionen produzierten Sequenzen) erhöht wurde, wie im zweiten Bericht vom Januar 2019 beschrieben. Auch im Impfstoff MMRVax Pro von Merck, das mit derselben Methode im Jahr 2017 analysiert wurde, konnte das Rötelnvirus-Genom gefunden werden, ohne in so tiefe Tiefen vordringen zu müssen, was beweist, dass die Methode funktioniert.


Bemerkung 4

„Die Genome zahlreicher kontaminierender Organismen, die zu zahlreichen Taxa gehören, könnten nachgewiesen werden, darunter Helminthen, Bakterien und zufällige humanpathogene Viren. Ein weiteres Problem in den dargestellten Tabellen besteht in der Häufigkeit von Sequenzen, die auf Viren zurückzuführen sind, die in das menschliche Genom integriert sind (Endoviren verschiedener Art), oder in retroviralen Sequenzen, von denen bekannt ist, dass sie im normalen menschlichen Genom zu finden sind (dies ist beispielsweise der Fall bei Sequenzen) integrierte Retroviren, die mit HIV verwechselt werden können) oder im Genom von Hühnerembryonalzellen, die für die Impfstoffherstellung verwendet werden, typischerweise als falsche Zuordnung zu kontaminierenden Genomen bei der DNA- oder RNA-Sequenzierung, abhängig von der jeweiligen betrachteten Endosequenz. Erstens sind in den Tabellen des Berichts zahlreiche Arten aufgeführt, die auf der Grundlage einer Reihe von Messwerten ermittelt wurden, die vollständig in das statistische Rauschen einbezogen sind. 3 oder weniger Lesevorgänge sind ein riskantes Verfahren, das zu einer hohen Anzahl von Fehlalarmen führt. "

Antwort 4

Die auf der Corvelva-Website im Dezember veröffentlichte Version des Berichts, auf die Sie verweisen, wurde kürzlich mit einer Version aktualisiert, in der ein Teil der Kontaminanten vorab mit alternativer Software und dann manuell validiert wurde. Die erste Analyse wurde bewusst ohne Filter durchgeführt, um jedes mögliche Signal und alle Probleme im Zusammenhang mit einer "offenen" Analyse hervorzuheben. Der Zweck unserer Arbeit besteht nicht, wie bereits mehrfach wiederholt, darin, eine Analyse der Chargenfreigabe durchzuführen, sondern ein vorläufiges Screening und anschließend eine laborübergreifende Bestätigung der aufgetauchten kritischen Probleme durch den Einsatz einer in diesem Bereich etablierten Technologie. genomisch, bereits auf Impfstoffen angewendet und in Kürze auch von Zulassungsbehörden und großen Pharmaunternehmen zur Steigerung der Qualität und damit der Sicherheit des Produkts.

Wenn Sie die Grenze von 3 Lesevorgängen definieren (basierend auf was?), Könnten wir zumindest die Anzeichen für das Vorhandensein endogener Retroviren in diesem Impfstoff für wahrscheinlich halten (Humanes endogenes Retrovirus K: 32 Lesevorgänge von 125 Bp, entsprechend 4000 Bp und HERVH- env 62: 4 liest, entsprechend 500 bp), die RNA-seq-Daten ein, die definitionsgemäß das transkribierte und daher potentiell aktive Material darstellen.

Stattdessen stimme ich Ihnen zu, dass die in den DNA-seq-Daten gefundenen retroviralen Sequenzen Proviren sein können, die in das menschliche Genom integriert sind, da der betreffende Impfstoff sehr viel menschliche DNA enthält.

Ich erinnere mich, dass im Attenuvax-Impfstoff (Masern-Impfstoff) 4 Sequenzen mit 700 bp (Victoria JG, Wang C, Jones MS, Jaing C, McLoughlin K, Gardner S ua) virale Nukleinsäuren in attenuierten Lebendimpfstoffen nachgewiesen wurden Minderheitenvarianten und ein zufälliges Virus: J Virol 2010; 84: 6033–40), die erstmals in einem Impfstoff eine Kontamination mit dem Avian Leukosis Virus (ALV) durch NGS nachweisen konnten und anschließend durch verschachtelte PCR bestätigt wurden.


Bemerkung 5

"In Bezug auf die erste dieser potenziellen Kontaminanten, das nicht pathogene stickstofffixierende Bakterium Bradyrhizobium, ist sein" Aussehen "in Sequenzierlabors Es ist allgemein als Problem im Zusammenhang mit der Vorbereitung der zu sequenzierenden Proben bekanntzurückzuführen auf die Kontamination von DNA-Reinigungskits, Wasser und zu verwendenden Reagenzien. Ein bekanntes Problem, bei dem in der Arbeit der "exploratorischen" Genomik eine Kontrollprobe, die beispielsweise Wasser enthält, parallel zur untersuchten Probe sequenziert wird

Antwort 5

Die Weißen wurden hergestellt (sowohl aus der Extraktion als auch aus der Bibliothek), aber Bibliotheken wurden nicht erhalten, und daher war es nicht möglich, sie auf dem Sequenzer laufen zu lassen, um genau zu überprüfen, was die Reagenz- / Umweltkontamination ist. Es werden jedoch Anstrengungen unternommen, um zu verstehen, was "physiologische" Kontaminationen sind, und auch Ringversuche werden dazu beitragen, mögliche laborabhängige bakterielle Kontaminationen festzustellen.


Bemerkung 6

„Was die beiden Arten von Würmern anbelangt, die in der RNA-Sequenzierungsanalyse aufgedeckt wurden, reicht es aus, zu beobachten, dass sie in den entsprechenden DNA-Sequenzierungsanalysen nicht vorhanden sind, wo sie viel besser nachweisbar sein sollten. Folglich erscheint das tatsächliche Vorhandensein der beiden Spezies als ein Artefakt, das im Lichte derselben präsentierten DNA-Sequenzierungsdaten nicht bestätigt werden kann.

Angesichts der Überlegungen ist es daher nicht möglich, das Vorhandensein eines der berichteten kontaminierenden Genome zu bestätigen, und es gibt starke Hinweise, die uns veranlassen, über das Vorhandensein zahlreicher falsch positiver Ergebnisse nachzudenken. "

Antwort 6

Die zweite Version des Berichts sah bereits eine erste Validierung einiger gefundener Organismen vor, sowohl mit alternativer Software als auch manuell.

Die Auswertung der fehlerhaften Zuordnungen der Kraken-Software (darüber hinaus eine der am häufigsten von der Wissenschaft verwendeten Software für Genom-Metagenom-Analysen) wird verwendet, um eine Ad-hoc-Bioinformatik-Pipeline für diese Art von Analyse zu entwickeln, für die keine weiteren Analysen erforderlich sind. Software- und manuelle Inspektion (außerdem auf dem Gebiet der Metagenomik wegen des Fehlens spezifischer und besonders genauer Datenbanken auf dem neuesten Stand der Technik üblich).


Bemerkung 7

Die nachgewiesene menschliche DNA hätte ein hohes Molekulargewicht und die Abdeckung des menschlichen Genoms wäre vollständig, so dass das gesamte Genom menschlicher fötaler Zellen und nicht Teile davon in den untersuchten Impfstoffchargen vorhanden wären.

"Im Priorix Tetra-Impfstoff hat die humane genomische DNA ein hohes Molekulargewicht (> 10.000 bp) und die gesamte sequentielle Abdeckung des gesamten menschlichen Referenzgenoms (HG-19) zeigt, dass es sich um das gesamte Genom der verwendeten fötalen Zellen handelt die Impfviruskultur vorhanden sein und nicht nur Teile davon. ""

Für die angegebene Aussage wird kein direkter Beweis erbracht, unbeschadet des Vorhandenseins von DNA mit einem Gewicht von etwa 100.000 Basen, die durch Gelelektrophorese von den Autoren entdeckt wurde (dokumentiert mit einer minderwertigen Zahl in dem CORVELVA-Dokument, von dem es ratsam wäre, ein hohes Original zu erhalten) Auflösung, um zu beurteilen, ob die Daten intakt dargestellt werden).

Die Autoren vergessen jedoch, dass die DNA einiger der abgeschwächten Viren, die in dem fraglichen Impfstoff vorhanden sind, ungefähr die gleiche Größe aufweist wie das, was sie im Gel enthüllt haben (zum Beispiel beträgt die DNA des Windpockenvirus 125 kb). Selbst wenn Sie Spuren von DNA mit hohem Gewicht in dem dargestellten Gelbild sehen möchten, kann dies eindeutig auf die DNA der abgeschwächten Viren im Impfstoff und nicht auf Fragmente menschlicher DNA zurückgeführt werden. Auch hier sehen wir uns mit einer Überinterpretation des experimentellen Ergebnisses konfrontiert. Was das zweite Element anbelangt, auf das sich die CORVELVA-Behauptung stützt, nämlich dass das gesamte menschliche Genom in Impfstoffen vorhanden sein würde, so müssen wir nicht einmal auf die detaillierten Abdeckungsdaten zugreifen, um deren Konsistenz zu bewerten: Die verwendete Sequenzierungstiefe und die Anzahl der erhaltenen Lesevorgänge machen diese Aussage völlig unplausibel. Darüber hinaus erlaubt die verwendete Sequenzierungstechnik, die auf kurzen Sequenzen von 125 Nukleotiden basiert, nicht, zu definieren, ob ein Genom fragmentiert ist. Die verwendete Sequenzierungstechnik erlaubt nur die Schätzung des Anteils der sequenzierten genomischen DNA.

Antwort 7

Die humane DNA in diesem Impfstoff ist ungefähr 8 zu 1 relativ zur Windpocken-DNA (88% der Messwerte stammen vom Menschen, verglichen mit 11% der Windpocken in der letzten analysierten Charge A71CB256A). Andere abgeschwächte dsDNA-Viren sind im Impfstoff nicht vorhanden, da Masern-, Mumps- und Rötelnviren einzelsträngige RNA-Viren sind, die auf Agarosegel nicht sichtbar sind. NGS ist eine quantitative Technologie, daher ermöglicht uns eine einfache fluorimetrische Quantifizierung der Gesamt-DNA, die aus dem Impfstoff extrahiert wurde (z. B. Charge A71CB256A = 3,7 Mikrogramm pro Dosis), verbunden mit der Berücksichtigung der oben gemachten relativen Quantifizierung (8: 1) Um sagen zu können, dass die zelluläre DNA etwa 2,9 Mikrogramm pro Dosis beträgt, verglichen mit etwa 0.74 Mikrogramm Windpocken-DNA. Es ist daher plausibel, dass zumindest ein Teil der DNA mit hohem Molekulargewicht, die auf dem Gel zu sehen ist, die der Zellen der fötalen Zelllinie MRC5 sein kann.

Der direkte Beweis, dass in diesem Produkt ein KOMPLETTES menschliches Genom (d. H. Mit nicht kodierenden Genen und Sequenzen) vorhanden ist, das fragmentiert ist oder nicht, wird durch das Ergebnis der Ausrichtung der vom Menschen abgeleiteten Lesungen auf dem menschlichen Referenz-hg19 erbracht.

Die folgende orange hervorgehobene Tabelle zeigt das in 'Av_cov = durchschnittliche Abdeckung' ausgedrückte Ergebnis der Ausrichtung der menschlichen Sequenzen der 3 auf menschlichen Chromosomen getesteten Priorix-Chargen (1., 2. und 3. Charge). In Spalte 1 ist chrM mitochondriale DNA, während Chr1 bis ChrY die zusammengesetzten menschlichen Chromosomen sind, einschließlich der Geschlechtschromosomen X und Y. Spalte 2 zeigt die Länge der zusammengesetzten menschlichen Chromosomen, die in Basenpaaren exprimiert werden.

Vaccinegate Letter Bucci Tabelle

Die Abdeckung ist gering (Avg_cov im Durchschnitt entlang jedes Chromosoms <als 1x), aber die Homogenität der Verteilung der eindeutig ausgerichteten Lesevorgänge entlang aller menschlichen Chromosomen und das Vorhandensein von Lesevorgängen, die mit einer höheren Abdeckung des Genoms übereinstimmen Mitochondrien (in menschlichen Zellen gibt es 2 Genome, ein Kern etwa 3 Gbp groß und in Chromosomen unterteilt und ein kleineres, kreisförmiges Mitochondrien mit etwa 16 Kbp) ermöglicht es uns jedoch zweifellos, eine Situation zu erkennen, die einer Tiefpass-Genomsequenzierung eines menschlichen Genoms ähnelt Individuell. Zum leichteren Verständnis dessen, was angegeben ist, gibt es in dem grün gekennzeichneten Teil eine menschliche Tiefpass-Gesamtgenomsequenzierung (5 Proben, 4 Frauen und 1 Mann) in einer Tiefe, die derjenigen ähnelt, die für die 3 Impfstoffchargen von Priorix Tetra erzeugt wurde.

Ein Hinweis auf das Geschlecht des Individuums (höchstwahrscheinlich des Mannes) im Impfstoff kann auch aus der Beziehung zwischen der durchschnittlichen Abdeckung für das X- und das Y-Chromosom abgeleitet werden.

Die in den zuvor sequenzierten Chargen von Priorix enthaltene humane DNA wurde auch als zur Fötuslinie MRC-5 gehörend qualifiziert, bei der es sich um die kontinuierliche Zelllinie aus Lungengewebe eines männlichen abortiven Fötus der 60er Jahre handelt, in der das Virus des Windpocken und Röteln. Die Analyse der im Impfstoff enthaltenen Varianten der mitochondrialen DNA im Vergleich zur mitochondrialen DNA der MRC-5-Linie (die DNA der Zelllinie wurde von ATCC, der weltweit wichtigsten Ressource für biologisches Standardmaterial, bezogen) zeigt, dass es sich um dasselbe Individuum handelt.


Bemerkung 8

"Es gibt seit langem Hinweise darauf, dass selbst sehr hohe Dosen menschlicher DNA selbst über lange Beobachtungszeiträume keine signifikanten Risiken hervorrufen können, wie durch bestätigt Studien über nichtmenschliche Primatenaus klinischen Erfahrungen mit Impfstoffen und anderen biologischen Arzneimitteln und aus jüngste Studien zur Risikobewertung was darauf hindeutet, dass selbst in außereuropäischen Ländern, in denen es Schwellenwerte für die Menge injizierbarer DNA gibt, diese Schwellenwerte unnötig streng sind. "

Antwort 8

Der Artikel von 1995 (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S104510568570036X?via%3Dihub) betrifft eine von Ihnen zitierte Studie über Primaten, die meines Erachtens sicherlich nicht ausreicht, um das Fehlen von Infektiosität, Onkogenität und Autoimmunität von in Kinder injizierter menschlicher DNA zu belegen, wie von denselben Autoren im letzten Teil der Diskussion ausgeführt. In dem Experiment wird eine große Menge menschlicher DNA in Affen injiziert, daher keine DNA der gleichen Spezies.

Der zweite zitierte Artikel (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23569076) gibt sehr deutlich an, dass die restliche DNA bei 2 Mikrogramm infektiös ist, auch wenn dieser Grenzwert in jedem Fall aus einer statistischen Auswertung und nicht aus experimentellen Daten stammt. In jedem Fall würde der Priorix-Impfstoff gemäß den Angaben des Autors eine Menge an fötaler DNA aufweisen, die eindeutig der Menge entspricht, die als ansteckungsgefährdet eingestuft wurde.

Merck für den Varivax-Impfstoff (Windpocken, attenuiertes Lebendvirus) gibt in der amerikanischen Packungsbeilage an, dass humane fötale DNA aus MRC-5-Zellen vorhanden ist, die nach den von Dr. Deisher durchgeführten Analysen eine Menge von etwa 2 Mikrogramm zu haben scheint.

Im Fall der italienischen Packungsbeilage des Priorix Tetra ist das Vorhandensein von DNA der MRC-5-Linie jedoch nicht angegeben, obwohl es sich um Mengen in der Größenordnung des amerikanischen Varivax handelt. In jedem Fall sind 2 Mikrogramm fetale DNA von MRC-5 meiner Meinung nach keine Restmenge, sondern ein echter Bestandteil des Impfstoffes.

Die In-vitro-Studien von Dr. Deisher, von denen wir hoffen, dass sie in Kürze veröffentlicht werden, zeigen leider rätselhafte Ergebnisse, wenn ein Impfstoff, der fötale humane DNA (hypomethyliert) enthält, in vitro mit humanen hämatopoetischen Stammzellen inkubiert wird. Wir warten aber auf die Veröffentlichung der Recherche und können uns dann wieder zum Thema treffen.


Loretta Bolgan *

* Doktor der Chemie und Pharmazeutischen Technologien, Promotion in Pharmazeutischen Wissenschaften an der Harvard Medical School Boston. Sie arbeitete in der pharmazeutischen Industrie, wo sie sich mit der Registrierung und Entwicklung von Forschungsprojekten im Bereich Onkologie befasste. Der beratende Teil des Gesetzes 210/92 über Umweltverschmutzung und Berufskrankheiten nahm an der letzten parlamentarischen Untersuchungskommission über abgereichertes Uran in der Impfstoffgruppe teil. Der derzeitige Berater des National Order of Biologists für die Toxikologie von Arzneimitteln und Impfstoffen befasst sich auch mit Ernährung und ergänzenden Therapien.


Herunterladen: CORVELVA-d.ssa-Loretta-Bolgan-meets-a-Bucci.pdf