Vaccinegate: Vollständige Genomsequenzierung von MRC-5 in Priorix Tetra

Vaccinegate: Vollständige Genomsequenzierung von MRC-5 in Priorix Tetra

Diese letzteren Analysen waren dank des aktiven Beitrags der französischen Verbände möglich Verein Liberté Informationen Santé (ALIS), Ligue nationale pour la liberté des Impfungen (LNPLV) und der australische Verband Australisches Netzwerk für Impfrisiken (AVN) das danken wir.


Die Sequenzer der neuen Generation haben sich zu Instrumenten der Wahl für eingehende Analysen auf dem Gebiet der Biologie und Medizin entwickelt, insbesondere für Präzisionsanalysen. Diese Tools ermöglichen einen neuen und umfassenderen Ansatz für eine Reihe von Anwendungen wie De-novo-Sequenzierung, Metagenomikstudien, Epigenomik, Transkriptomsequenzierung und Genom-Re-Sequenzierung.

Die letztgenannte Anwendung (Re-Sequencing) ist sowohl für Forschungs- als auch für Diagnosezwecke im menschlichen Bereich weit verbreitet und besteht in der Sequenzierung eines gesamten einzelnen Genoms mit der NGS-Technologie (Next Generation Sequencing), um einzelne Nukleotidmutationen (SNP) abzubilden. Aussprache "snip"), Insertionen und Deletionen von mehr oder weniger langen Sequenzen traten an bestimmten Positionen des Genoms und Variationen in der Anzahl der Kopien von Teilen des Genoms / der Gene (CNV, Copy Number Variants) auf. 

Dieses Verfahren ist nützlich, um die Mechanismen der Entwicklung einiger Pathologien zu verstehen, um die Richtungen für eine zukünftige klinische Behandlung, wie im Fall von Krebs, zu identifizieren. Tatsächlich kann mit dieser Methode das genetische Erbe eines Krebspatienten im Normal- und Tumorgewebe vollständig entschlüsselt werden, sodass nachvollzogen werden kann, was sich im Genom geändert hat, und wenn möglich, mit gezielten Protokollen eingegriffen werden kann.

Das Re-Sequenzierungsverfahren erfordert, dass die DNA eines Individuums mechanisch in kleine Fragmente (400-500 Basenpaare) zerlegt wird und dass Fragmente an künstliche DNA-Trakte, sogenannte Adapter, gebunden werden, die es ermöglichen, die Fragmente von zu binden Menschliche DNA auf eine Glasoberfläche, auf der dann die Basen abgelesen werden (A, C, G, T). Die DNA-Basen werden durch Einbau chemischer Reaktionen von mit fluoreszierenden Molekülen markierten Nukleotiden ausgelesen. Die Millionen von Sequenzen (Reads), die durch Sequenzieren auf der Glasoberfläche erhalten wurden, werden dann mit geeigneter Software auf das humane Referenzgenom abgebildet, und daher werden alle im analysierten Genom vorhandenen Varianten in Bezug auf die Referenz identifiziert. 

Das gleiche Verfahren wurde am menschlichen Genom durchgeführt, das in der Priorix Tetra-Charge vorhanden war. n. A71CB256A, Genom der MRC-5-Zelllinie (fetalen Ursprungs); Die Arbeit wurde bei einem Unternehmen in den USA durchgeführt, das sich routinemäßig mit der Analyse menschlicher Genome durch Re-Sequenzierung befasst. *

* Der Name des Labors, das diese Analyse durchgeführt hat, wird in die nächste Erklärung aufgenommen, die wir bei der Staatsanwaltschaft in Rom sowie bei den italienischen und europäischen Kontrollstellen hinterlegen werden. Die Realität, die die Ergebnisse der von Corvelva finanzierten Analysen hinterlegt, wird ebenfalls sofort mit diesen rätselhaften Ergebnissen aktualisiert. Wir leugnen nicht, dass wir als Eltern in erster Linie über die Ergebnisse, über die wir unten berichten, besorgt sind - wenn das, was wir bisher entdeckt haben, nicht ausreicht.


Ergebnisse

Es wurde festgestellt, dass das humane Referenzgenom zu 99.76% und damit fast vollständig von den aus der Impfstoff-DNA stammenden Messwerten bedeckt ist. Die in diesem Impfstoff dargestellte fetale humane DNA ist daher ein vollständiges individuelles Genom oder liegt im genomischen DNA-Impfstoff aller Chromosomen eines männlichen Individuums vor (und tatsächlich ist der Fötus, von dem die MRC-5-Zelllinie stammt, männlich).

Nachfolgend sind die Ergebnisse der Analyse der verschiedenen Arten von Varianten in Bezug auf das humane Referenzgenom aufgeführt.


Einzelne Nukleotidvarianten (SNP) und kurze Insertionen / Deletionen (InDels)

Die Varianten der einzelnen DNA-Basen (SNP, ausgesprochen "snip") sind Polymorphismen, dh Variationen des genetischen Materials, die von einem einzelnen Nukleotid getragen werden. Die "InDels" hingegen sind kleine Insertionen und Deletionen mit einer Länge von weniger als 50 pb und bilden eine weitere Klasse genomischer Varianten im menschlichen Genom.

Insgesamt wurden ungefähr 3.6 Millionen SNPs im menschlichen Impfgenom identifiziert (von denen 98.31% bereits in der öffentlichen Datenbank dbSNP und 61.805 neue oder originale dieser DNA gemeldet wurden) und ungefähr 804 InDels (von denen 89.42% bereits vorhanden sind) gemeldet in dbSNP und 85.106 neu). 

Die Menge an SNP entspricht den Angaben in der Literatur zu einem "typischen menschlichen Genom", während die Indels in einer höheren Menge vorliegen als die Angaben des "The 1000 Genomes Project Consortium" (800 gegenüber 600).

CNV (Copy Number Variants) und SV (Structural Variants)

Varianten der Kopienanzahl (CNV) sind genomische Varianten aufgrund von Variationen der Kopienanzahl relativ großer Fragmente (länger als 50 bp) zwischen einzelnen Genomen. Es gibt zwei Arten von CNV: Typ "Gewinn" (Gewinn von Kopien) und Typ "Verlust" (Verlust von Kopien). Im menschlichen Impfstoffgenom wurden 218 CNVs nachgewiesen, von denen 82 vom "Gain" -Typ (der einen Teil des Genoms von ungefähr 6.9 Millionen Basenpaaren abdeckt) und 136 CNVs mit "Verlust" (der einen Teil des Genoms abdeckt) sind etwa 70 Millionen Basen).

Wie vom 1000 Genomes Project Consortium in "Eine globale Referenz für die genetische Variation des Menschen (Nature, Bd. 526, 10. Oktober 2015)" beschrieben, enthält ein typisches menschliches Genom 2.100 bis 2.500 große Varianten, darunter:

  • 1.000 große Deletionen
  • 160 Variationen in der Anzahl der Exemplare (CNVs)
  • 10 Inversionen

die insgesamt, auch unter Berücksichtigung der Insertionen, auf 20 Millionen Sequenzbasen einwirken.

Wie für kurze INDELs beobachtet, stimmt das Impfgenom selbst bei großen Insertionen und Deletionen nicht mit einem "normalen" menschlichen Genom überein und ist viel "umgeordneter" als das Genom eines gewöhnlichen Individuums.


Zirkuläre Visualisierung des Genoms (Circos Plot)

Eine grafische Darstellung des Impfstoffgenoms mit der Bezeichnung "circos plot" (das üblicherweise zur Darstellung eines neu sequenzierten Genoms verwendet wird) ist nachstehend neben einem anderen Genom dargestellt, das ein neu sequenziertes Genom darstellt, das von aus Blut extrahierter DNA ausgeht eines gesunden Individuums - "normales" Genom:

corvelva mrc5 1


Bedeutung der verschiedenen konzentrischen Kreise

corvelva mrc5 2

7) Der zentralste Ring repräsentiert die Inferenz von SV (Strukturvarianten) im Exon- und Spleißbereich. ZWISCHEN (Orange, Translokationen), INS (Grün, Insertionen), DEL (Deletionen, Grau), DUP (Duplikationen, Rosa) und INV (Inversionen, Blau).

6) Der sechste Ring repräsentiert die Schlussfolgerung von CNV (Varianten in der Anzahl der Kopien). Rot bedeutet, DNA-Stücke zu gewinnen, und Grün bedeutet Verlust.

5) Der fünfte Ring repräsentiert den Anteil von SNP an der Homozygotie (orange) und an der Heterozygotie (grau) im Histogrammstil.

4) Der vierte Ring (grün) repräsentiert die Dichte snp in einem "Dispersionsgraphen" -Stil.

3) Der dritte Ring (schwarz) repräsentiert die Dichte der INDELs in einem "Dispersionsgraphen" -Stil.

2) Der zweite Ring (blau) repräsentiert die Abdeckung von Lesevorgängen im Histogrammstil.

1) Der äußere Kreis (der erste Kreis) ist die Chromosomenzahl.     

Ein grober Vergleich kann auch zwischen fötaler DNA und HeLa-Zell-DNA gemacht werden, der immortalisierten Zelllinie, die auch bei der Herstellung des Polio-Impfstoffs verwendet wird.

corvelva mrc5 3

Es ist zu betonen, dass sich die Translokationen der HeLa-Zellen, die im Circos-Plot durch die Kernlinien dargestellt sind, auf das gesamte Genom beziehen (daher kodierender und nicht kodierender Teil), während sie sich im Fall von fötalen Impfstoffzellen nur auf die kodierenden Gene beziehen.

Non occorre essere degli scienziati per capire dai circos, semplicemente a colpo d’occhio, che il genoma vaccinale non è un genoma che si può definire “normale”.  Le linee arancio intrecciate al centro del circos, non presenti così numerose nell’anello corrispondente del genoma “normale”, fanno già da sole intuire l’anomalia di questo genoma.


Schlussfolgerungen 

Die im Prorix-Chargen-Impfstoff enthaltene humane genomische DNA. n. A71CB256A ist offensichtlich anomal und weist erhebliche Inkonsistenzen in Bezug auf ein typisches menschliches Genom auf, dh das eines gesunden Individuums. Es gibt zahlreiche unbekannte Varianten (nicht in öffentlichen Datenbanken erfasst) und einige von ihnen befinden sich in Genen, die an Krebs beteiligt sind. Offensichtlich anomal ist auch das überschüssige Genom, das Veränderungen in der Anzahl der Kopien (CNV) und Strukturvarianten (SV) aufweist, wie Translokationen, Insertionen, Deletionen, Duplikationen und Inversionen, von denen viele Gene betreffen.

Der mögliche Beitrag der vielen Varianten (die in der wissenschaftlichen Literatur und in öffentlichen Datenbanken nicht vorhanden sind) zum Phänotyp der für das Wachstum von Impfviren verwendeten Zellen ist nicht bekannt.


Im PDF finden Sie alle Erkenntnisse, die sich auch auf die Auswirkungen auf die Gesundheit und die Korrespondenz mit der EMA beziehen.


 Herunterladen: CORVELVA-Ri-Genom-Sequenzierung-human-Priorix-Tetra.pdf