הקדמה

ראשית, ברצוננו להודות להערות השימושיות ביותר שנמסרו על ידי אלו שסקרו את תוצאות הניתוחים שבוצעו במסגרת פעילויות מחקריות מדעיות הנוגעות למוצרי Priorix tetra ומוצרי Infanrix Hexa. הנושאים הקריטיים שהוצגו אכן היו מועילים מאוד על מנת להוסיף שילובים טכניים-מדעיים המסוגלים להבהיר את העבודה שנעשתה. אנו מאמינים כי רק באמצעות שיתוף פעולה בריא של חזיונות מדעיים ניתן להגיע למסקנות על הנתונים המתקבלים שיכולים להועיל לכלל הקהילה המדעית ולאנשים הפונים אליה.

1. מצב אמנות

מחקרים מקדימים (סינון שאינו כפוף לאישור) של הפרופיל הביומולקולרי, המטבוליסטי והפרוטאומי, שנערכו במוצרי Priorix Tetra ו- Infanrix Hexa, הובילו למסגרת הרכב המסוכמת בנקודות הבאות:

1. נוכחות של אותות אנליטיים שונים שלא ניתן לקשר לתרכובות ידועות באמצעות מחקר במאגרי המידע Metlin 1-2 ו- KEGG3. לפיכך הופיעה תמונה הקשורה למורכבות ניכרת בהרכב המוצרים המסחריים.
2. נוכחות של חלבונים שלא הוכרזו בעלון במוצר ה- Priorix Tetra. זה האחרון יכול להיות קשור לשאריות של תהליך הייצור
3. אי גילוי האנטיגנים המוצהרים במוצר Infanrix Hexa. טכניקת הניתוח כללה עיכול אנזימטי עם טריפסין הקשורים לטכניקות ספקטרומטריה המונית. 4-5

נתונים אלה העלו מספר הערות במיוחד ביחס לנקודה ג '- גילוי חלבונים מתבצע למעשה בגישה סטנדרטית, המוכרת בינלאומית במשך למעלה מ- 10 שנים 4, של עיכול באמצעות אנזים טריפסין 4. הפפטידים שמתקבלים בכך מופרדים כרומטוגרפיים ומנותחים באמצעות ספקטרומטריה מסה 4-5. התצפית העיקרית טמונה בעובדה שבחיסונים ישנם תכשירים מבוססי אלומיניום העלולים לעכב את תהליך העיכול האנזימטי. הנתונים שנרכשו לאחר מכן אפשרו הבהרות מהותיות, במיוחד ביחס לתלונה שבאה לידי ביטוי בנקודה ג.

2. תובנות וניתוח חדשים

2.1 תובנות הקשורות לניתוח המוצר Infanrix Hexa

לפני שממשיכים באיור הנתונים הנרכשים החדשים הנוגעים לחיסונים נגד הקסון וגארדס 9, חיוני לענות על השאלה הנוגעת לספק שהעלה ביחס לעיכוב הפעילות הפרוטאוליטית של טריפסין הנגרמת על ידי נוכחות של תכשירים מבוססי אלומיניום ב- Infanrix Hexa. חיסון. בהקשר זה יש לציין כי תמיד קיים בקרת עיכול בתוך העיכול הטריפטיק. למעשה, לטריפסין ששימש לביצוע עיכול, אף שהוא מיועד למניעת אוטוליזה, יש אחוז קטן מהאחרון שבמקרה של פעילות אנזימטית מוביל להשגת השבר שיש לו m / z 842 ואת רצף הפפטיד הבא: VATVSLPR. השבר האמור התגלה למעשה בעיכול הטריפטי של המוצר Infanrix Hexa כפי שניתן לאמת אותו באמצעות הכרומטוגרמה של מיצוי היונים (איור 1).

איור 1: איור 842: כרומטוגרמה מיצוי יונית הקשורה ליון ביחס של m / z 21 שנמצאה במדגם של חלקת המוצר Infanrix Hexa (מספר אצווה A072CDXNUMXD).

יתר על כן, בקרה חיצונית מבוצעת על ידי עיכול המוגלובין, על מנת לאמת עוד את טובת הרבה טריפסין בשימוש. המוגלובין, שנותח בסעיף הניתוח בו פיקח על המוצר, זוהה עם ציון סטטיסטי מובהק (loge <- 100). נתונים אלה אישרו את העובדה שפעילות האנזים הייתה קיימת.

2.2 ניתוחים חדשים בנושא מוצרי הקסיון וגרדסיל

הניתוח של מוצרי Hexyon ו- Gardas 9 הוביל לגילוי של פרופילים מולקולריים מורכבים. אולם במקרה זה, זוהתה נוכחותם של מרבית האנטיגנים המדווחים בעלון המידע. הם התגלו על ידי עיכול טריפטי ובנוכחות אביזרים.

עובדה זו מחזקת עוד יותר את ההוכחות שתגובת העיכול של הטריפטיקה אינה מעוכבת בנוכחות אביזרים נלווים. במקרה של חיסונים נגד Hexyon ו- Gardas 9, המורכבות של הפרופיל המולקולרי יוחסה בעיקר לנוכחותם של מינים רבים, בעלי משקל מולקולרי נמוך, שלא ניתן לזהותם בבסיסי הנתונים המתייחסים Metlin 1-2- ו- KEGG 3.

3. מסקנות ושיקולים סופיים

הניתוחים שנערכו הובילו למסקנה של הדברים הבאים:

1. הפרופיל המולקולרי של החיסונים שניתחו הוא בדרך כלל מורכב ולא ידוע ברובו.
2. ישנם זיהומי חלבון שלא הוכרזו בעלון, אשר הרכבם משתנה.
3. במספר מקרים האנטיגנים שהוכרזו בעלון לא אותרו. ניתן לייחס עובדה זו למספר גורמים. בין האחרונים ניתן לשקול את הרגישות של השיטה בה נעשה שימוש. עם זאת, אנו חשים שאנו יכולים להחריג את תופעת עיכוב העיכול כתוצאה מנוכחותם של אביזרים נלווים בגיבוש החיסון. למעשה, הפעילות האנזימטית מאושרת בעיקר על ידי נוכחותם של שברי אוטוליזה טריפטית, בתוך פתרונות החיסונים המעוכלים (בקרה פנימית).

4. מחקרים עתידיים

מחקרים נוספים יבוצעו כחלק מפעילות המחקר והפיתוח שמטרתם לחקור את ההיבטים הבאים:

1. הרכב מקרומולקולרי הקשור לשאריות מוצקות הקיימות בחיסונים (ניתוח MALDI TOF MS); 5
2. הערכת ריכוז המתכות הקיימות במוצרים.
3. ניתוח ברמה השנייה לאישור נוכחות של תרכובות רעילות שהתגלו בשלב הסקר. לאחר מכן, ריכוזם יהיה קשור לרעילות זהה על פי האמור בגיליונות הבטיחות הבינלאומיים. הניתוחים ברמה השנייה יבוצעו בהתאם להנחיה האירופית EU / 2002/657 / EC, מועילים להבטיח תקני איכות גבוהים בתחום הספקטרומטריה ההמונית. 6

לורטה בולגן

5. הפניות ביבליוגרפיות

1. Autenhahn R, Cho K, Uritboonthai W, Zhu Z, Patti G, Siuzdak G (ספטמבר 2012). "זרימת עבודה מואצת למטבוליומיקס בלתי ממוקד באמצעות בסיס הנתונים של METLIN". ביוטכנולוגיה טבע. 30: 826–828. דוי: 10.1038 / nbt.2348. PMC 3666346. PMID 22965049.
2. סמית CA, I'Maille G, רוצה EJ, Qin C, Trauger SA, Brandon TR, Custodio DE, Abagyan R, Siuzdak G (דצמבר 2005). "METLIN: בסיס נתונים ספקטרלי המוני של מטבוליטים" (PDF). תרופת מוניט. 27 (6): 747–51. דוי: 10.1097 / 01.ftd.0000179845.53213.39. PMID 16404815.
3. Kanehisa M (2013). "האבולוציה הכימית והגנומית של רשתות התגובה המונזזות באנזים". סגן FEBS 587 (17): 2731–7.
4. כריסטוני S, ברנרדי LR. "ביואינפורמטיקה בניתוח נתונים של ספקטרומטריה המונית למחקרי פרוטאומיקה." פרוטומיקס מומחה. 2004 דצמבר; 1 (4): 469-83.
5. כריסטוני S, ברנרדי LR. "פיתוח מתודולוגיות חדשות לחקר ספקטרומטר מסה של מקרומולקולות ביו אורגניות." ספקטרום מסה. Rev. 2003 נובמבר-דצמבר; 22 (6): 369-406.
6. כריסטוני S, דוסי G, ברמילה פ, אלביני א, קונטי מ, ברמילה מ, ברונו א, די גאודיו פ, פרלין ל, טזארי V, מנגוזי ס, באררה ס, סיאלר סי, טרנטי ט, קאנטו מ, רוסי ברנרדי ל, נונאן ד.מ. "SANIST: אופטימיזציה של טכנולוגיה לזיהוי מורכב המבוססת על הנחיית האיחוד האירופי עם יישומים בניתוח פלילי, תרופות ומזון." ג'יי מאס ספקטרום. 2017 ינואר; 52 (1): 16-21. doi: 10.1002 / jms.3895.

הורדה: CORVELVA-סופי-טכני-Report.pdf

תורגם על ידי צוות CLiVa - www.clivatoscana.com