דווח על התוצאות שהושגו עד כה (מרץ 2019)

דווח על התוצאות שהושגו עד כה (מרץ 2019)

אנו רוצים לנהל את המצב ביחד איתך. שמונה חודשים עברו מאז יולי 2018 ובתוך פרק זמן זה הגענו לתוצאות מספקות במיוחד. הצגנו תוכנית מחקר ובנוגע לניתוח החיסונים אנו מסוגלים לנקודת התייחסות, עם היעדים שהושגו, יעדים שהושלמו ואלה שתוכננו רק לעת עתה.

ראשית, ניתוחים של 2 תרכובות לכל חיסון אומתו באמצעות תקנים תוך שימוש בתקני בקרה מוסמכים בריכוז בסדר גודל של מיקרוגרם / מ"ל. התרכובות שבחרנו הן מאלו הידועות בפרופיל הסיכון הקריטי שלהן. אנו מדברים על כמות מצטברת, כמות כוללת של אלה המוכרים כזהויות וכאלה שיש לזהות, אותם ניתן להעריך בסדר גודל של 50 מיקרוגרם / מ"ל, בניגוד להנחיות EMA / FDA.

בדיקות אלו הניבו תוצאות חיוביות, ולכן הן מאשרות באופן מלא את שיטת הניתוח! הזיהום שנצפה נובע ככל הנראה מתופעות ונושאים שונים של תהליכי ייצור שונים. מה שנצפה במהלך המחקרים הוא וריאציה "בין קבוצות" של ההרכב, מה שגורם לנו להניח שיש כמה צעדים לאורך כל תהליך ייצור המוצר שקשה לשלוט בהם.


ניתוחים כאלה אפשרו לנו להשיג את הצעדים הבאים:

  • הערכת התאמה להרכב כמפורט בגיליון הנתונים של החיסון
  • בדיקת זיהום כימי וחלבון / פפטידי, כמו גם אלו שמקורם בחומר גנטי
  • מחקר אישור של תרכובות יעד כימיות וחלבון באמצעות תעודות בדיקה סטנדרטיות

החיסונים הבאים הועברו לסקר ראשוני:

  • Infanrix Hexa - GlaxoSmithKline Biologs sa
  • Priorix Tetra - GlaxoSmithKline SpA
  • הקסון - סנופי פסטר אירופה
  • גרדאסיל 9 - חיסונים נגד MSD

החיסונים האחרים הללו נותחו כסקר ראשוני:

  • חצבת חיסון חי BP - קבוצת פונוואלה (Profarma AG, באר)
  • MMR vax Pro - חיסונים נגד MSD, צרפת
  • PolioInfanrix - GlaxoSmithKline, בלגיה
  • Fluad - Seqirus Srl, סיינה
  • Vivotif - PaxVax, בריטניה

טכנולוגיות משומשות

המחקר בנוי ב:

טומאה וניתוח זיהום כימי וחלבון

  • מערכת הניתוח LC-SACI / ESI-MS הקשורה לפלטפורמת SANIST החלוצית שימשה לביצוע בדיקת זיהוי ראשונית על החיסונים המעניינים, כמו גם כדי לאשר אותה עם תקני הבקרה, עם רמה מינימלית בין הננוגרם ל מיקרוגרם / מנה
  • טכנולוגיית MALDI-TOF-MS שימשה לחקר המקרומולקולות הבלתי פתירות שנמצאו בחיסונים

ניתוח של חומר גנטי

  • בדיקה לנוכחות חומצות גרעין (DNA / RNA) ממקור אנושי ובעלי חיים ומיקרואורגניזמים (וירוסים, חיידקים) בשיטת רצף הדור הבא, המאפשרת לכמת את רצף החומרים הגנטיים הכלולים בחיסונים בספציפית מאוד ובאופן מדויק
  • אימות התכתבויות של חיידקים ושל נגיף חיסונים חיים מנוכי ובלתי מופעלים (נוכחות של גרסאות גנטיות)

ניתוח כמותי של מתכות

  • טכנולוגיית ICP-MS איפשרה לכמת את המתכות הקיימות בחיסונים עם מגבלה מינימלית של 5ng / מנה.

ניתוח זיהום כימי וחלבון

לאחר בדיקה ראשונה שאיתרה נוכחות של מאות איתותים כימיים בתוך החיסונים, בוצעו בדיקות אישור באמצעות סטנדרטים של 2 תרכובות לחיסון, תוך שימוש בתקני בקרה מוסמכים, שנבחרו מאלו הידועים בפרופיל הסיכון הקריטי שלהם כמות שאינה שיורית (כמו להיחשב כמרכיב החיסונים, ולכן יש לכלול בגליון הנתונים הטכניים וכימות).

בדיקות אלה הניבו תוצאות חיוביות, ולכן הן מאשרות באופן מלא את שיטת הניתוח. עד כה רק שני תרכובות נבדקו מסיבות כלכליות בלבד, למעשה מחקר זה אינו שלם מכיוון שהוא מוגבל על ידי העלות הרבה של הסקר, אך בחרנו לזהות את התקנים הרלוונטיים יותר באשר למגבלות הרגולטוריות והוא אמור יש לקחת בחשבון כי חקירה מעמיקה מסוג זה לא צריכה להיות תלויה בנו.

הזיהומים שנצפו הם ככל הנראה כתוצאה מתופעות ונושאים שונים של תהליכי ייצור שונים. מה שראינו לאורך שלבי המחקר הוא וריאציה בין ההרכב בין המון, מה שגורם לנו להניח שיש כמה צעדים לאורך כל ייצור הייצור של המוצר שקשה לשלוט בהם. בהתחשב בגורמים האנליטיים הרגילים ניתן להניח כי הריכוז הוא בסדר גודל של מיקרוגרם / מ"ל. באשר לכמות המצטברת ניתן להעריך על סמך הערכה חצי-כמותית (מכיוון שרוב התרכובות אינן ידועות) כי המזהמים הם בסדר גודל של 50 מיקרוגרם / מ"ל. זהו נתונים חשובים מכיוון שההנחיות של EMA / FDA מאוד ברורות לגביו. אסור שיהיו זיהומים (מתחת לרמת הגילוי) או אם יש לזהות אותם יש לזהות היטב ויש להוכיח שיטות מתאימות להפחתתם. במקרה זה המזהמים אינם מתחת לרמת היכולת של מכשיר הזיהוי (ng / mL) ולכן אנו מאמינים כי המפיק אינו משתמש בשיטות טיהור כלשהן. באשר לנוכחות וירוסים הרפתקנים הבעיה אינה קיימת מכיוון שאסור להם להיות נוכחים כלל.

  • בהמשך - מתקיימים ניתוחי אישור בינלאומיים של תרכובות אלה.
    התרכובות שזוהו בתקן תקבלו אישור מחדש באותה טכנולוגיה על ידי מעבדות שונות. אחת המטרות שלנו היא לתאם פרויקט זה גם עם תמיכה ושיתוף פעולה של עמותות בינלאומיות.

  • בהמשך - חקר kinetics המשקעים של אנטיגנים קשורים מאלומיניום.

ניתוח מטגנומי

  • בהמשך - ניתוח עם תקני בקרת DNA ו- RNA נוספים של אצווה חיסונים אחרת.
    מתחילת פרויקט זה היה ברור לנו כי יש לבצע את הניתוחים, כדי לעמוד בדרישות הנחוצות של המשכפול ודיוק ה- Dat, עם המכשור המתקדם ביותר, ובאמצעות מעקב אחר גיוון כלשהו בתוך אותה אצווה ובין שונות בקבוצות. ככל שאנו ממשיכים בחקירות, מנותחות אחרות ננותחות ברציפות, ככל הנראה בזכות התקציב וזמינות המוצרים.

  • בהמשך - ניתוח רצף של גנום DNA עוברי מקו התא MRC-5.
    מאז מההקרנה הראשונה הייתה לנו ההזדמנות לוודא בתקן כי הקווים הדיפלואידים בהם נעשה שימוש היו MRC-5, כאמור בגיליון הנתונים הטכניים. ברצוננו להעמיק את המחקר של קו תאים זה גם מתוקף העובדה שנוכחותו מדהימה בכמויות ובממדים.

  • בהמשך - חקר גרסאות מינוריות (quasispecies) של נגי חצבת, חזרת ו אדמת.
    בהשוואה לדוח הראשון ביולי 2018 (https://bit.ly/2UCC2iS) הזמנו מחקר מעמיק על הגרסאות הקלות שכן מוטציות בנגיפי חיסון מנוכחים לא היו היחידות שנמצאו. גם נושא זה מעלה ספק גדול לגבי יעילות החיסון ובטיחותו. תוצאה זו תיקח זמן רב יותר מהדוחות האחרים מכיוון שיש לבצע אימות 'רצפי המוטנטים' באופן ידני.

  • בהדרגה - ניתוח אישור בינלאומי
    זיהינו מעבדות זרות ולאומיות שאליהן הזמנו את שכפול הניתוח בסטנדרט. תוצאה זו תהיה זמינה בקרוב.

פרויקטים הנבדקים

מחקר על עוצמת אנטיגנים לחיסון: מחקר זה צריך להיערך במרכז שהוסמך על ידי סוכנויות הרגולציה למחקר הפרה-קליני של חיסונים. המטרה היא לוודא אם אנטיגנים החיסונים מסוגלים לייצר או להיקשר לנוגדנים ספציפיים (ההשערה היא כי הנוגדנים הללו מגנים, אולם ניתוח זה אינו מאפשר לנו להוכיח כי החיסון מסוגל להגן מפני המחלה). עלות שלב זה יכולה להיות רלוונטית, ולכן הפרויקט הוא כרגע רק השערה.


הורדה: CORVELVA-דו"ח-on-the-תוצאות-obtained.pdf


תורגם על ידי צוות CLiVa - www.clivatoscana.com