הקדמה

ראשית, ברצוננו להודות להערות השימושיות ביותר שנמסרו על ידי אלה שצפו בתוצאות הניתוחים, שבוצעו במסגרת פעילויות מחקר מדעיות, הנוגעות למוצרי Priorix tetra ו- Infanrix Hexa. הנושאים הקריטיים שנחשפו היו למעשה שימושיים מאוד על מנת להוסיף שילובים טכניים-מדעיים המסוגלים להבהיר את העבודה שנעשתה. אנו מאמינים כי רק באמצעות שיתוף פעולה בריא של חזיונות מדעיים ניתן להגיע למסקנות על הנתונים המתקבלים שיכולים להועיל לכלל הקהילה המדעית ולאנשים הפונים אליה.

1. מצב אמנות

המחקרים המקדימים (סינון שאינו כפוף לאישור) של הפרופיל הביומולקולרי, המטבוליסטי והפרוטאומי, שנערכו על מוצרי Priorix Tetra ו- Infanrix Hexa, הובילו לתמונת קומפוזיציה שסיכמה בנקודות הבאות:

1. נוכחות של אותות אנליטיים שונים שלא ניתן לקשר לתרכובות ידועות באמצעות חיפושים בבסיסי נתונים של Metlin ^1-2 ו- KEGG ³. לפיכך הופיעה תמונה הקשורה למורכבות ניכרת בהרכב המוצרים המסחריים.
2. נוכחות של חלבונים לא מוצהרים בעלון במוצר ה- Priorix Tetra. זה האחרון יכול להיות קשור לשאריות מתהליך הייצור
3. אי גילוי האנטיגנים שהוכרזו בתוך מוצר Infanrix Hexa. טכניקת הניתוח כללה עיכול אנזימטי עם טריפסין הקשורים לטכניקות ספקטרומטריה המונית. ^4-5

נתונים אלה העלו מספר הערות, במיוחד ביחס לנקודה ג '- איתור חלבונים מתבצע למעשה בגישה סטנדרטית, המוכרת בינלאומית במשך למעלה מעשר שנים ⁴עיכול דרך האנזים טריפסין ⁴. הפפטידים המתקבלים בכך מופרדים כרומטוגרפיים ומנותחים באמצעות ספקטרומטריה המונית ^4-5. התצפית העיקרית הייתה טמונה בעובדה שתרכובות אדג'וונט מבוססות אלומיניום קיימות בחיסונים העלולים לעכב את תהליך העיכול האנזימטי.

הנתונים שנרכשו לאחר מכן אפשרו לספק הבהרות מהותיות, במיוחד לגבי המחלוקת שנמצאה בסעיף ג.

2. תובנות וניתוחים חדשים

2.1 מידע נוסף על ניתוח המוצר Infanrix Hexa

לפני שממשיכים באיור הנתונים החדשים שנרכשו בנוגע לחיסונים הקסון וגרדאסיל 9, חובה לענות על השאלה הטמונה בספק שהועלה ביחס לעיכוב הפעילות הפרוטאוליטית של טריפסין הנגרמת על ידי נוכחות של תכשירים מבוססי אלומיניום. בחיסון Infanrix Hexa. בהקשר זה, יש לציין כי תמיד קיים בקרת עיכול בתוך העיכול הטריפטי. למעשה, לטריפסין ששימש לביצוע עיכול, אף שהוא מיועד למניעת אוטוליזה, יש אחוז קטן מהאחרון אשר במקרה של פעילות אנזימטית מוביל להשגת השבר שיש לו m / z 842 ואת רצף הפפטיד הבא. : VATVSLPR. שבר זה התגלה למעשה בתוך העיכול הטריפטי של המוצר Infanrix Hexa כפי שניתן לאמת אותו באמצעות הכרומטוגרמה של מיצוי היונים (איור 1).

איור 1: כרומטוגרמה של מיצוי יונים הקשורה ליון ביחס 842 / m 21 שהתגלה במדגם הנוגע לאצווה של המוצר Infanrix Hexa (מספר אצווה A072CDXNUMXD).

בנוסף, מבוצעת בדיקה חיצונית על ידי עיכול המוגלובין, על מנת לאמת עוד יותר את טובת הרבה טריפסין בשימוש. המוגלובין, שנותח בסעיף הניתוח בו היה פיקוח על המוצר, הוכר עם ציון סטטיסטי מובהק (loge <-100). נתונים אלה אפשרו לאשר את העובדה שפעילות האנזים הייתה קיימת.

2.2 ניתוחים חדשים הקשורים למוצרי הקסון וגארדסיל

הניתוח של מוצרי ה- Hexyon ו- Gardasil 9 הוביל לגילוי של פרופילים מולקולריים מורכבים. אולם במקרה זה, זוהתה נוכחותם של מרבית האנטיגנים המדווחים בעלון. הם התגלו על ידי פעולה על ידי עיכול טריפטי ובנוכחות אביזרים. עובדה זו מחזקת עוד יותר את הראיות לכך שתגובת העיכול הטריפטית אינה מעוכבת בנוכחות אביזרים נלווים.

במקרה של חיסוני Hexyon ו- Gardasil 9, המורכבות של הפרופיל המולקולרי יוחסה בעיקר לנוכחותם של מינים רבים, בעלי משקל מולקולרי נמוך, שלא ניתן לזהותם דרך מאגרי המידע של Metlin. ^1-2 ו- KEGG ³.

3. מסקנות ושיקולים סופיים

הניתוחים שנערכו הובילו למסקנה הבאה:

1. הפרופיל המולקולרי של החיסונים שניתחו הוא בדרך כלל מורכב ולא ידוע ברובו.
2. ישנם זיהומי חלבון שלא הוכרזו בעלון, אשר הרכבם משתנה.
3. במספר מקרים האנטיגנים שהוכרזו בעלון לא אותרו. ניתן לייחס עובדה זו למספר גורמים. בין האחרונים ניתן לשקול את הרגישות של השיטה בה נעשה שימוש. עם זאת, אנו חשים שאנו יכולים להחריג את תופעת עיכוב העיכול כתוצאה מנוכחותם של חומרים מסייעים בנוסח החיסון. למעשה, הפעילות האנזימטית מאושרת בעיקר על ידי נוכחותם של שברי האוטוליזה הטריפטית, בתוך פתרונות החיסונים המעוכלים (בקרה פנימית).

4. מחקרים עתידיים

מחקרים נוספים יבוצעו כחלק מפעילות המחקר והפיתוח שמטרתם לחקור את ההיבטים הבאים:

1. הרכב מקרומולקולרי הקשור לשאריות מוצקות הקיימות בחיסונים (ניתוח MALDI TOF MS); ⁵
2. הערכת ריכוז המתכות הקיימות במוצרים.
3. ניתוח ברמה השנייה לאישור נוכחות של תרכובות רעילות שהתגלו בשלב הסקר. לפיכך ריכוזם יהיה קשור לרעילותם על סמך האמור בגיליונות הבטיחות הבינלאומיים. הניתוחים ברמה השנייה יבוצעו בהתאם להנחיה האירופית EU / 2002/657 / EC שימושי להבטיח תקני איכות גבוהים בתחום הספקטרומטריה ההמונית. ⁶

באמונה
ד.ססה לורטה בולגן

5. הפניות ביבליוגרפיות

1. Autenhahn R, Cho K, Uritboonthai W, Zhu Z, Patti G, Siuzdak G (ספטמבר 2012). "זרימת עבודה מואצת למטבוליומיקס בלתי ממוקד באמצעות בסיס הנתונים של METLIN". ביוטכנולוגיה טבע. 30: 826–828. דוי: 10.1038 / nbt.2348. PMC 3666346. PMID 22965049.
2. סמית CA, I'Maille G, רוצה EJ, Qin C, Trauger SA, Brandon TR, Custodio DE, Abagyan R, Siuzdak G (דצמבר 2005). "METLIN: בסיס נתונים ספקטרלי המוני של מטבוליטים" (PDF). תרופת מוניט. 27 (6): 747–51. דוי: 10.1097 / 01.ftd.0000179845.53213.39. PMID 16404815.
3. Kanehisa M (2013). "האבולוציה הכימית והגנומית של רשתות התגובה המונזזות באנזים". סגן FEBS 587 (17): 2731–7.
4. כריסטוני S, ברנרדי LR. "ביואינפורמטיקה בניתוח נתונים של ספקטרומטריה המונית למחקרי פרוטאומיקה." פרוטומיקס מומחה. 2004 דצמבר; 1 (4): 469-83.
5. כריסטוני S, ברנרדי LR. "פיתוח מתודולוגיות חדשות לחקר ספקטרומטר מסה של מקרומולקולות ביו אורגניות." ספקטרום מסה. Rev. 2003 נובמבר-דצמבר; 22 (6): 369-406.
6. כריסטוני S, דוסי G, ברמילה פ, אלביני א, קונטי מ, ברמילה מ, ברונו א, די גאודיו פ, פרלין ל, טזארי V, מנגוזי ס, באררה ס, סיאלר סי, טרנטי ט, קאנטו מ, רוסי ברנרדי ל, נונאן ד.מ. "SANIST: אופטימיזציה של טכנולוגיה לזיהוי מורכב המבוססת על הנחיית האיחוד האירופי עם יישומים בניתוח פלילי, תרופות ומזון." ג'יי מאס ספקטרום. 2017 ינואר; 52 (1): 16-21. doi: 10.1002 / jms.3895.

הורדה: CORVELVA-דו"ח-טכניקה-Finale.pdf