Queremos fazer um balanço da situação junto com você. Oito meses se passaram desde julho de 2018 e, nesse período, alcançamos resultados extremamente satisfatórios. Apresentamos um programa de pesquisa e, em relação à análise de vacinas, podemos fazer um ponto de referência, com os objetivos alcançados, aqueles que estão sendo finalizados e os que estão sendo planejados apenas por enquanto.

Para começar, as análises de 2 compostos para cada vacina foram verificadas por meio de padrões, usando padrões de controle certificados com uma concentração na ordem de microgramas / mL. Os compostos que escolhemos estão entre os conhecidos por seu perfil de risco crítico. Estamos falando de uma quantidade cumulativa, uma quantidade total daqueles reconhecidos como identidades e aqueles a serem identificados, que podem ser estimados na ordem de 50 microgramas / mL, em contraste com as diretrizes da EMA / FDA.

Estes testes deram resultados positivos e, portanto, confirmam completamente o método de análise! As contaminações observadas provavelmente se devem a fenômenos e tópicos diferentes e variáveis ​​do processo de fabricação. O que foi observado no decorrer dos estudos é uma variação da composição entre lotes, o que nos leva a supor que existem algumas etapas ao longo de todo o processo de fabricação do produto que são difíceis de controlar.

Estudo do perfil metagenômico ⁵

Os testes metagenômicos da vacina "Priorix Tetra" apresentaram uma população de vírus mutantes, para cada vírus atenuado, chamados quasispecies. As variantes genéticas dos antígenos da vacina podem alterar significativamente a segurança da vacina e sua eficácia. Além disso, existem sérios dilemas, não apenas de natureza médica e científica, mas também de natureza ética; listamos abaixo os pontos que são mais relevantes para nós:

1. A quantidade de DNA: A presença de DNA fetal foi confirmada em grandes quantidades: 1.7 μg no primeiro lote e 3.7 μg no segundo lote, cerca de 325 vezes maior que o limite máximo de 10 nanogramas e 325,000 vezes maior que o limite mínimo de 10 picogramas, limites que a EMA nos disse para nos referirmos apenas a células conhecidas por atividade carcinogênica. ^6-7
   
   
2. Tamanho do DNA: Determinamos com mais precisão o tamanho dos fragmentos de DNA detectados e foi estabelecido que o DNA contido tem um peso molecular de 20,000 / 60,000 bp. Isso significa basicamente que não existem "fragmentos" de DNA dentro dessa droga, isto é, degradados, mas um genoma intacto, pertencente a um ser humano masculino, confirmado pela comparação entre o DNA fetal da vacina.
   
   e o da linha celular MRC-5 utilizada para a produção da vacina.
   
   
3. Não detecção do vírus da rubéola: com o nível de sequenciamento utilizado para a triagem, não foi possível detectar o vírus da rubéola. Como havia dúvida de que houve um erro no procedimento usado, o nível de seqüenciamento aumentou significativamente para uma profundidade muito alta (260 milhões de seqüências produzidas). Dessa forma, o vírus da rubéola foi detectado em 114 cópias, igual a 0.00004% do total das seqüências e, através de uma leitura manual das sequências, foi possível eliminar qualquer fonte de erro do software utilizado e confirmar definitivamente o (mínimo) presença de rubéola na amostra. Contudo, este procedimento também permitiu identificar avírus dventitious presente em números baixos de cópias, e o que foi visto é que o número de cópias dos vírus adventícios excede o número do vírus da rubéola.
   
   
4. Portanto, havia duas outras questões muito importantes a serem resolvidas:
   
   1. A rubéola na vacina está em quantidade suficiente para produzir um efeito imunogênico ou pode ser considerada sublimiar (ou seja, uma contaminação acidental)? 

   
   2. Os vírus adventícios estão realmente presentes? Se sim, eles podem ser perigosos? 


Referências: