Проблема в методе, анализах, Корвельве или других интересах?

В качестве предпосылки к чисто техническому ответу на статью заместителя Беллы появился Ежедневный фактАссоциация Corvelva должна подчеркнуть, что представитель Движения 5 звезд получил, как и все парламентарии Республики, несколько электронных писем с приложенным анализом. Таким образом, любой, и тем более, учитывая его интерес со стороны профессора Беллы, легко установить, что наша ассоциация никогда не предлагала эти результаты как окончательные, и, действительно, в нескольких случаях подчеркивалось, что это анализ первого уровня Это, однако, уже породило многочисленные проблемы, и именно в свете этого мы решили довести эти выводы до сведения всех вовлеченных сторон: информировать учреждения, граждан, политику о возможном и конкретном риске для здоровья. что впереди. Прежде всего, мы никогда не выдвигали абсолютных истин, на самом деле, мы были и полны сомнений, и мы всегда просили диалога по теме, которая к настоящему времени усугубляет настроение и позиции.

Мы сожалеем о том, что депутат Белла предпочел отвечать на газеты, а не беспокоиться о родителях, которые уже сообщили ему о критических проблемах, возникших в последние месяцы; вместо этого нам импонирует то, как профессор химии, ныне занятый политикой, делает грубые ошибки, критикуя метод, который он НЕ видел и, очевидно, НЕ знает. Теперь, столкнувшись с таким поведением, резко контрастирующим с тем, что его партия, движение «5 звезд», всегда говорило, мы задаем себе следующий вопрос: от имени кого говорит Белла? Является ли заместитель Беллы судящим, не имея предварительных условий, или у Пятизвездочного движения есть проблема согласованности? С одной стороны, депутаты, которых мы с радостью называем почетными членами, такие как Сара Куниал, становятся доступными для гражданина и являются представителями запросов гражданского общества в соответствии с принципами действия, которыми всегда было покрыто Движение; с другой стороны, его коллеги, такие как Белла, издеваются и нападают на ряд данных под предлогом, не задумываясь о силе, которая заставляет нас как родителей идти вперед, платить за методы последнего поколения, чтобы пролить свет на интересующий нас вопрос. все, и что в первую очередь влияет на здоровье итальянских детей, проходящих вакцинную профилактику.
Что ж, ясно, что у профессора Беллы есть причины, которые нам неизвестны, но это, очевидно, не касается диалога и гражданской конфронтации, ни любви к науке, чтобы начать атаку вслепую и даже немного грубо ; действительно, кажется, руководствуется личными предубеждениями.

Заместитель Белла, почему вы защищаете то, чего явно не знаете?

Посох Корвельвы

Уважаемый профессор Белла,

Мы пишем, чтобы ответить на ваши последние комментарии. В частности, мы хотели бы углубить и детализировать технические замечания, выделенные ею. Поэтому мы сообщаем ниже текст его речи, отвечая точками:

Замечание 1

«Из того, что можно вывести из так называемой« технической привязанности », эти анализы никоим образом не подтверждают наличие указанных веществ. Прежде всего, одна только масс-спектрометрия позволяет идентифицировать только то, что является «молекулярным весом» данного химического вещества (например, 145 дальтон). Существует множество комбинаций атомов, которые дают одинаковую молекулярную массу (изомеры). Любой, кто прошел базовый курс по органической химии в средней школе, знает, что изомеры, несмотря на одинаковый элементный состав, представляют собой соединения с совершенно разными химическими, физическими и биологическими свойствами. Например, возможные изомеры углеводорода с 30 атомами углерода составляют несколько миллиардов, все с одинаковой молекулярной массой ».

Ответ 1

В области идентификации неизвестных веществ (Фабрессе Н., Лараби И.А., Страттон Т., Мистрик Р., Пфау Г., Лорин де ла Грандмасон Г., Эттинг И., Грассин Делиле С., Альварес Дж.С. Разработка чувствительной нецелевой жидкостной хроматографии масс-спектрометрии высокого разрешения скрининг, посвященный анализу волос через общую базу данных спектров MS2: шаг к раннему обнаружению новых психоактивных веществ (Drug Test Anal. 2018 5 ноября), который обычно используется для проведения двух аналитических шагов:

1. Этап скрининга, на котором проверяется ПОТЕНЦИАЛЬНОЕ присутствие соединений;
2. Фаза подтверждения, на которой отбираются соединения-кандидаты для идентификации с использованием аналитических стандартов, сертифицированных производителем;

Тот факт, что CORVELVA в настоящее время ограничивается проведением фазы следственного скрининга, всегда указывался. Мы обеспечим определенную идентификацию соединений, как только проведем подтверждающие тесты, как того требуют обычно используемые процедуры.

Замечание 2

«Кроме того, во время анализа с помощью масс-спектрометрии молекулы фрагментируются, генерируя артефакты, поэтому существует вероятность того, что видимые сигналы даже не являются следствием присутствия молекул».

Ответ 2

Это утверждение неверно. Масс-спектрометрия состоит из семейства технологий, которые варьируются в основном в зависимости от следующих факторов:

1. Источник ионизации (EI, CI, ESI, APCI, APPI, SACI и т. Д.);
2. Линзы с ионной фокусировкой;
3. Анализатор (QQQ, ионная ловушка, TOF, FTICR и т. Д.);

Анализы, которые мы провели, были выполнены с использованием источника ионизации, называемого поверхностно-активированной химической ионизацией (SACI). В литературе известно, что технология мягкой ионизации, работающая при низких напряжениях и в условиях поляризации растворителя, не вызывает фрагментации (Cristoni S, Rubini S, Bernardi LR. Разработка и применение поверхностно-активированной химической ионизации Mass Spectrom Rev. 2007 сентябрь-октябрь; 26 (5): 645-56).

Замечание 3

«Наконец, одна только масс-спектрометрия не позволяет измерять количество отдельных веществ, не говоря уже о смеси»

Ответ 3

Еще одно неверное и ненаучное утверждение. Масс-спектрометрия признана во всем мире как метод, способный анализировать тысячи молекул (Roux A1, Lison D, Junot C, Heilier JF. Применение жидкостной хроматографии в сочетании с метаболомикой на основе масс-спектрометрии в клинической химии и токсикологии: Обзор. Clin Biochem., 2011, январь; 44 (1): 119-35). Этому способствовало появление масс-спектрометров с высоким разрешением и точностью масс (Eliuk S1, Makarov A. Evolution of Orbitrap Mass Spectrometry Instrumentation. Annu Rev Anal Chem (Palo Alto Calif). 2015; 8: 61-80. doi: 10.1146 / annurev-evenm-071114-040325.) и соединение последних с системами разделения, в основном на основе методов газовой или жидкостной хроматографии (Wong JW1, Wang J2, Chow W2, Carlson R3, Jia Z4, Zhang K1, Hayward DG1, Chang JS5. Перспективы жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии высокого разрешения для скрининга пестицидов в пищевых продуктах J. Agric Food Chem. 2018 сентября 19; 66 (37): 9573-9581.). Например, масс-спектрометрия считается эталонным методом для выполнения качественного и количественного анализа пестицидов в смеси (Wong JW1, Wang J2, Chow W2, Carlson R3, Jia Z4, Zhang K1, Hayward DG1, Chang JS5. Перспективы по жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии высокого разрешения для скрининга пестицидов в пищевых продуктах J Agric Food Chem.2018 сентября 19; 66 (37): 9573-9581.).

Замечание 4

«Есть базы данных, в которых заказаны некоторые вещества, известные по молекулярной массе. В техническом приложении отсутствуют масс-спектры. Есть просто таблица: якобы идентифицированных веществ, полученных путем их произвольного выбора из базы данных и с описанием на итальянском языке (полученных в нескольких случаях, вероятно, через Google и с многочисленными ошибками, например, путем явного смешения двух классов соединений, амидов и аминов см рисунок)

Ответ 4

Вещества были подвергнуты ЭКРАНИРОВАНИЮ (не подтверждено, как всегда указано), и распознавание осуществлялось с использованием алгоритма SANIST (Альбини А1, Брига Д2, Конти М3, Бруно А2, Фариоли Д1, Канали С2, Согно I2, D ' Ambrosio G2, Consonni P2, Noonan DM2,4 SANIST: быстрая масс-спектрометрическая платформа для сбора и разработки данных SACI / ESI для проверки потенциальных потенциальных биомаркеров. Rapid Commun Mass Spectrom. 2015 окт. 15; 29 (19): 1703-10) которые опирается на международные базы данных под названием KEGG (Menikarachchi LC1, Hill DW, Hamdalla MA, Mandoiu II, Grant DF. In silico ферментативный синтез 400,000 2013 составных биохимических баз данных для нецелевой метаболомики. J Chem Inf Model. 23 Sep 53; 9 (2483 ): 92-1) и METLIN (Смит CA2005, O'Maille G, Want EJ, Qin C, Trauger SA, Brandon TR, Custodio DE, Abagyan R, Siuzdak G. METLIN: база данных масс-спектральных метаболитов. METLIN: метаболит масс-спектральная база данных. Ther Drug Monit. 27 Dec; 6 (747): 51-XNUMX.). Этот факт был четко изложен в технических отчетах, выпущенных CORVELVA.

Слово "алкиламид" является явной ошибкой, которая могла быть обнаружена средством проверки правописания во время транскрипции отчета. Тот факт, что это амин, явно содержится в названии соединения, данном как ПОТЕНЦИАЛЬНЫЙ кандидат (3-бутен-1-амин). В любом случае, ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ идентификация дается по названию соединения, а не по семейству, к которому оно принадлежит. Тем не менее, спасибо за сообщение об этом небольшом «незначительном исправлении», которое мы исправим в ближайшее время.

Замечание 5

«Казалось бы, тот, кто составил этот документ, даже не осознавал, что изомеры не могут быть выделены с помощью масс-спектрометрии»

Ответ 5

Еще одна неточность: изомеры могут быть разделены с помощью масс-спектрометрии. В частности, дистеризомеры могут быть разделены хроматографически (Somoano-Blanco L1, Rodriguez-Gonzalez P2, Centineo G3, Fonseca SG3, Garcia Alonso JI1. Одновременное определение α-, β- и γ-гексабромциклододекановых диастереоизомеров в пробах воды путем изотопного разбавления с использованием (81) Br-меченых аналогов. J Chromatogr A. 2016 Jan 15; 1429: 230-7). Отсюда следует, что в случае диастеризомеров можно обнаружить более одного хроматографического пика на хроматограмме ионной экстракции с одинаковым отношением m / z. Кроме того, изомерные виды часто различаются также по спектру фрагментации, полученному в режиме тандемной масс-спектрометрии (MS / MS; Шу I1, Александр А2, Джонс М2, Джонс Дж2, Негрус А2. Определение состава энантиомера метамфетамина в человеческих волосах -хиральная жидкостная хроматография-тандемный метод масс-спектрометрии. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2016 Aug 15; 1028: 145-152; Фурел I1, Дамин-Перник М2, Бенуа Е2, Латтард V2. Ядро-оболочка LC-MS / МС метод количественного определения второго поколения антикоагулянтных родентицидных диастереоизомеров в печени крыс в связи с воздействием диких крыс. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2017 янв. 15; 1041-1042: 120-132.)

Замечание 6

«В этом случае один параметр, молекулярный вес, был выбран произвольно, и было заявлено, что этот единственный параметр приведет к« вероятной »идентификации. Это все равно, что сказать, что в комнате присутствовал кто-то ростом 170 см, и на основании этого был опознан человек, живущий в Китае, один, живущий в Индии и неприятный сосед, только потому, что все трое имеют рост 170 см "

Ответ 6

Не указывалось, что масс-спектрометрические измерения проводились с точной массой. Это означает, что отношение m / z получается путем отслеживания трех десятичных знаков. Это следует из того факта, что, хотя верно то, что существует множество ионов, которые могут иметь отношение m / z 140, гораздо меньше ионов имеют отношение m / z 140.123 с диапазоном ошибок около 5 ppm. Эта способность спектрометров, имеющих анализатор, способный определять точную массу молекулярных ионов, делает их подходящими для получения потенциальной идентификации сложных смесей. Эти технологии фактически широко используются для проверки сложности биологических жидкостей с целью исследования метаболических и белковых маркеров опухолей (Zhou W1, Petricoin EF 3rd2, Longo C2,3. Обнаружение биомаркеров на основе масс-спектрометрии. Методы Mol Biol. 2017 ; 1606: 297-311; Stoop MP1, Coulier L, Rosenling T, Shi S, Smolinska AM, Buydens L, Ampt K, Stingl C, Dane A, Muilwijk B, Luitwieler RL, Sillevis Smitt PA, Hintzen RQ, Bischoff R, Wijmenga SS, Hankemeier T., van Gool AJ, Luider TM. Количественный протеомический и метаболомный анализ нормальных образцов спинномозговой жидкости человека. Mol Cell Proteomics. 2010 сентябрь; 9 (9): 2063-75.).

Замечание 7

«Наконец, если бы у нас было подозрение на наличие гербицидного загрязнения в вакцинах, правильное поведение было бы публиковать данные анализа в любой форме (в данном случае масс-спектры), чтобы каждый мог убедиться, что они не идут делать сенсационные пресс-конференции вокруг »

Ответ 7

Как всегда утверждалось, проведенные тесты следует рассматривать как скрининг первого уровня. Как только будут проведены подтверждающие тесты, выполненные для соединений-кандидатов, представляющих наибольший интерес, данные будут опубликованы в журналах рецензирования.

Лоретта Болган *

* Доктор химии и фармацевтических технологий, доктор наук в области фармацевтики Гарвардской медицинской школы в Бостоне. Она работала в секторе фармацевтической промышленности, где занималась регистрацией и разработкой исследовательских проектов в области онкологии. Консультант по закону 210/92, загрязнение окружающей среды и профессиональные заболевания, участвовал в последней парламентской комиссии по расследованию по обедненному урану в группе вакцин. Нынешний консультант Национального ордена биологов по токсикологии лекарств и вакцин, он также занимается питанием и дополнительной терапией.

Скачать: CORVELVA-d.ssa-Лоретта-BOLGAN встречает а-Bella.pdf