Predgovor

Najprej bi se radi zahvalili zelo koristnim komentarjem, ki so jih dali tisti, ki so si ogledali rezultate analiz, izvedenih v okviru znanstveno-raziskovalnih dejavnosti, povezanih s proizvodi Priorix tetra in Infanrix Hexa. Izpostavljena kritična vprašanja so bila v resnici zelo koristna, da bi dodali tehnične in znanstvene integracije, ki bi lahko razjasnile opravljeno delo. Verjamemo, da lahko le z zdravim občevanjem znanstvenih vizij dobimo sklepe o pridobljenih podatkih, ki so lahko koristni za celotno znanstveno skupnost in ljudi, ki se nanjo obrnejo.

1. Stanje tehnike

Predhodne študije (presejalne preiskave, ki niso predmet potrditve) biomolekularnega, metabolomičnega in proteomskega profila, izvedene na izdelkih Priorix Tetra in Infanrix Hexa, so privedle do sestave sestavka, povzete v naslednjih točkah:

1. Prisotnost različnih analitičnih signalov, ki jih z iskanjem po bazah podatkov Metlin ni mogoče povezati z znanimi spojinami ^1-2 in KEGG ³. Zato se je pojavila slika, povezana s precejšnjo zapletenostjo sestave komercialnih izdelkov.
2. Prisotnost neprijavljenih beljakovin v zloženki v izdelku Priorix Tetra. Slednje je lahko povezano z ostanki proizvodnega procesa
3. Ne odkrivanje antigenov, prijavljenih znotraj izdelka Infanrix Hexa. Tehnika analize je obsegala encimsko prebavo s tripsinom, povezano z tehnikami masne spektrometrije. ^4-5

Ti podatki so sprožili več pripomb, zlasti glede točke C - Detekcija beljakovin se dejansko izvaja s standardnim pristopom, ki je mednarodno priznan že več kot 10 let ⁴prebava skozi encim tripsin ⁴. Tako dobljeni peptidi ločimo kromatografsko in jih analiziramo z masno spektrometrijo ^4-5. Glavno opazovanje je bilo povezano s tem, da so v cepivih prisotne pomožne spojine na osnovi aluminija, ki bi lahko zavirale encimski proces prebave.

Pozneje pridobljeni podatki so omogočili vsebinska pojasnila, zlasti glede spora iz točke c.

2. Nova spoznanja in analize

2.1 Nadaljnje informacije o analizi zdravila Infanrix Hexa

Preden nadaljujemo s ponazoritvijo novih pridobljenih podatkov o cepivih Hexyon in Gardasil 9, je nujno odgovoriti na vprašanje, ki je povezano z dvomom o zaviranju proteolitične aktivnosti tripsina, ki ga povzroča prisotnost dodatkov na osnovi aluminija. v cepivu Infanrix Hexa. V zvezi s tem je treba natančno določiti, da je znotraj triptovega digestata vedno prisoten nadzor prebave. V resnici ima tripsin, ki se uporablja za prebavo, čeprav je bil zasnovan za preprečevanje avtolize, majhen odstotek slednjega, kar v primeru encimske aktivnosti vodi do pridobitve fragmenta, ki ima m / z 842, in naslednjega peptidnega zaporedja : VATVSLPR. Ta fragment je bil dejansko odkrit znotraj triptovega digestata izdelka Infanrix Hexa, ki ga je mogoče preveriti z kromatogramom za ekstrakcijo ionov (slika 1).

Slika 1: kromatogram ionske ekstrakcije, povezan z razmerjem 842 iona v m / z, odkrit v vzorcu, ki se nanaša na serijo proizvoda Infanrix Hexa (šaržna številka A21CD072D).

Poleg tega se opravi zunanji pregled s prebavo hemoglobina, da se še bolj preveri dobro uporabljena količina tripsina. Hemoglobin, analiziran v oddelku za analizo, kjer je bil izdelek nadzorovan, je bil prepoznan s pomembno statistično oceno (loge <-100). Ti podatki so potrdili dejstvo, da je bila encimska aktivnost prisotna.

2.2 Nove analize v zvezi z izdelki Hexyon in Gardasil

Analiza izdelkov Hexyon in Gardasil 9 je privedla do odkritja zapletenih molekulskih profilov. V tem primeru pa je bila odkrita prisotnost večine antigenov, o katerih so poročali v navodilu. Zaznali so jih z delovanjem s poskusno prebavo in ob prisotnosti pomožnih snovi. To dejstvo še dodatno potrjuje dokaze, da reakcija probavne prebave ni zavirana v prisotnosti adjuvantov.

V primeru cepiv proti Hexyon in Gardasil 9 je bila zapletenost molekularnega profila pripisana predvsem prisotnosti številnih vrst z nizko molekulsko maso, ki jih ni mogoče prepoznati v referenčnih bazah Metlin ^1-2 in KEGG ³.

3. Sklepi in zaključki

Izvedene analize so privedle do naslednjega zaključka:

1. Molekularni profil analiziranih cepiv je na splošno kompleksen in večinoma neznan.
2. Obstajajo onesnaženosti z beljakovinami, ki niso navedene v navodilih, katerih sestava je spremenljiva.
3. V več primerih antigeni, navedeni v navodilih, niso bili odkriti. To dejstvo bi lahko pripisali več dejavnikom. Med slednje lahko štejemo občutljivost uporabljene metode. Vendar menimo, da lahko izključimo pojav inhibicije prebave zaradi prisotnosti adjuvansov v cepivi. Dejansko encimsko aktivnost potrjujejo predvsem prisotnost fragmentov triptične avtolize znotraj raztopin prebavljenih cepiv (notranji nadzor).

4. Prihodnje študije

V okviru raziskovalnih in razvojnih dejavnosti, namenjenih raziskovanju naslednjih vidikov, se bodo izvajale nadaljnje študije:

1. makromolekularni sestavek, povezan s trdnimi ostanki v cepivih (analiza MALDI TOF MS); ⁵
2. ocena koncentracije kovin v izdelkih.
3. Analiza druge stopnje za potrditev prisotnosti strupenih spojin, odkritih v presejalni fazi. Njihova koncentracija bo torej povezana z njihovo strupenostjo na podlagi tega, kar je navedeno v mednarodnih varnostnih listih. Analize druge stopnje bodo izvedene v skladu z evropsko direktivo EU 2002/657 / ES, koristno za zagotavljanje visokih standardov kakovosti v sektorju masne spektrometrije. ⁶

v veri
Dr Loretta Bolgan

5. Bibliografske reference

1. Autenhahn R, Cho K, Uritboonthai W, Zhu Z, Patti G, Siuzdak G (september 2012). "Pospešen potek dela za nepoškodovane metabolomike z uporabo baze METLIN". Naravna biotehnologija. 30: 826–828. DOI: 10.1038 / nbt.2348. PMC 3666346. PMID 22965049.
2. Smith CA, I'Maille G, Želim EJ, Qin C, Trauger SA, Brandon TR, Custodio DE, Abagyan R, Siuzdak G (december 2005). "METLIN: množična spektralna baza metabolitov" (PDF). Ter drog Monit. 27 (6): 747–51. DOI: 10.1097 / 01.ftd.0000179845.53213.39. PMID 16404815.
3. Kanehisa M (2013). "Kemična in genska evolucija reakcijskih mrež, kataliziranih z encimi". FEBS Leto 587 (17): 2731–7.
4. Cristoni S, Bernardi LR. "Bioinformatika v analizi podatkov množične spektrometrije za študije proteomike." Expert Rev Proteomics. 2004 dec; 1 (4): 469–83.
5. Cristoni S, Bernardi LR. "Razvoj novih metodologij za masno spektrometrijsko preučevanje bioorganskih makromolekul." Mass Spectrom Rev. 2003 november-december; 22 (6): 369-406.
6. Cristoni S, Dusi G, Brambilla P, Albini A, Conti M, Brambilla M, Bruno A, Di Gaudio F, Ferlin L, Tazzari V, Mengozzi S, Barera S, Sialer C, Trenti T, Cantu M, Rossi Bernardi L, Noonan DM. "SANIST: optimizacija tehnologije za identifikacijo sestavin na podlagi direktive Evropske unije z uporabo v forenzični, farmacevtski in živilski analizi." J. Mass Spectrom. 2017 Jan; 52 (1): 16–21. doi: 10.1002 / jms.3895.

Prenos: CORVELVA-Report-tehnika-Finale.pdf