Chcemy wspólnie z Tobą podsumować sytuację. Od lipca 2018 r. Do dzisiaj minęło 8 miesięcy, aw tych miesiącach osiągnęliśmy niezwykle satysfakcjonujące wyniki. Zaprezentowaliśmy program badawczy a jeśli chodzi o analizę szczepionek, jesteśmy w stanie wskazać pierwszy punkt sytuacji, z osiągniętymi celami, na etapie ukończenia i na etapie planowania.

Aktualizację tę rozpoczynamy od stwierdzenia, że ​​standardowe analizy 2 związków dla każdej szczepionki zostały potwierdzone przy użyciu certyfikowanych standardów kontrolnych o stężeniu rzędu mikrogramów / ml. Wybrane przez nas związki należą do związków znanych z ich krytycznego profilu zagrożenia. Mówimy o skumulowanej ilości, tj. Ogółem między ilościami potwierdzonymi jako tożsamość a tymi, które należy zidentyfikować, które można oszacować rzędu 50 mikrogramów / ml, w przeciwieństwie do wytycznych EMA / FDA.

Potwierdzenia te dały pozytywne wyniki, dlatego w pełni potwierdzają metodę analizy! Obserwowane zanieczyszczenia są prawdopodobnie spowodowane zjawiskami i zmiennymi związanymi z procesem produkcyjnym. Podczas badań zaobserwowano długoterminową zmienność tego składu, co prowadzi do założenia, że ​​istnieją procesy trudne do kontrolowania w całym procesie przetwarzania produktu.

Przeprowadzone analizy umożliwiły zakończenie następujących kroków:

• Ocena zgodności kompozycji, jak wskazano w karcie danych szczepionki
• Badania przesiewowe zanieczyszczeń chemicznych, białkowych / peptydowych i genetycznych
• Badanie potwierdzające związków docelowych (chemicznych i białkowych) z certyfikowanymi standardami kontroli

Następujące szczepionki zostały przeanalizowane „całkowicie”:

• Infanrix Hexa - GlaxoSmithKline Biologicals sa
• Priorix Tetra - GlaxoSmithKline SpA
  
• Hexyon — Sanofi Pasteur Europe
• Gardasil 9 - szczepionki MSD

Te inne szczepionki zostały przeanalizowane jako wstępny przegląd:

• Szczepionka przeciw odrze żywa BP - Poonawalla Group (Profarma AG, Baar)
• MMR vax Pro - MSD Vaccins, Francja
• PolioInfanrix - GlaxoSmithKline, Belgia
• Fluad - Seqirus Srl, Siena
• Vivotif - PaxVax, Wielka Brytania

Zastosowane technologie

Badanie zostało wyrażone na:

Analiza zanieczyszczeń oraz zanieczyszczeń chemicznych i białkowych

• System analizy LC-SACI / ESI-MS związany z innowacyjną platformą SANIST został wykorzystany zarówno do przeprowadzenia wstępnego badania przesiewowego identyfikacji interesujących szczepionek, jak i do potwierdzenia standardami kontroli, z minimalną granicą między nanogramami i mikrogramów / dawkę
• Technologia MALDI-TOF-MS została wykorzystana do badania nierozpuszczalnych makrocząsteczek obecnych w szczepionkach

Analiza materiału genetycznego

• Test obecności kwasów nukleinowych (DNA / RNA) pochodzenia ludzkiego i zwierzęcego oraz mikroorganizmów (wirusów, bakterii) przy użyciu metody sekwencjonowania nowej generacji, która pozwoliła na bardzo dokładne i dokładne określenie ilościowe sekwencji materiału genetycznego zawartego w szczepionkach zbadany

Analiza ilościowa metali

• Technologia ICP-MS pozwoliła na ilościowe oznaczenie metali obecnych w szczepionkach przy minimalnym limicie 5ng / dawkę.

Analiza zanieczyszczeń chemicznych i białkowych

Po wstępnym skriningu, który zidentyfikował setki sygnałów chemicznych w szczepionkach, potwierdzenia wykonano stosując standardowe 2 związki na szczepionkę, przy użyciu certyfikowanych standardów kontroli, wybranych spośród tych znanych z ich krytycznego profilu zagrożenia i ilości resztkowej (tak, że można je uznać za składniki szczepionek, dlatego należy je uwzględnić w karcie danych technicznych i określić ilościowo).

Potwierdzenia te dały pozytywne wyniki, dlatego w pełni potwierdzają metodę analizy. Na razie przeprowadzono je tylko na dwóch związkach ze względów czysto ekonomicznych, niniejsze badanie nie jest wyczerpujące, ponieważ jest ograniczone przez znaczny koszt badania, ale zdecydowaliśmy się zidentyfikować normy, które mają największy wpływ na ograniczenia regulacyjne i jest również prawdą, że tego rodzaju dokładne dochodzenie należałoby do nas.

Obserwowane zanieczyszczenia są prawdopodobnie spowodowane zjawiskami i zmiennymi związanymi z procesem produkcyjnym. Podczas badań zaobserwowano długoterminową zmienność tego składu, co prowadzi do założenia, że ​​istnieją procesy trudne do kontrolowania w całym procesie przetwarzania produktu. Biorąc pod uwagę zwykłe czynniki analityczne, można założyć, że stężenie jest rzędu mikrogramów / ml. Jeśli chodzi o ilość skumulowaną, możliwe jest oszacowanie na podstawie oceny półilościowej (ponieważ większość związków nie jest znana), że zanieczyszczenia są rzędu 50 μg / ml. Jest to ważne, ponieważ wytyczne EMA / FDA są jasne w tym względzie. Zanieczyszczenia nie mogą być obecne (poniżej granicy wykrywalności), a jeśli są, muszą być dobrze scharakteryzowane i udowodnione, że stosują odpowiednie metody w celu ich maksymalnego ograniczenia. W naszym przypadku stwierdzone zanieczyszczenia nie są poniżej granicy wykrywalności przyrządu (ng / ml) i dlatego naszym zdaniem producent nie stosuje żadnych metod oczyszczania. Jeśli chodzi o obecność wirusów przypadkowych, problem nie istnieje, ponieważ muszą być całkowicie nieobecne.

• W TRAKCIE - Trwają międzylaboratoryjne analizy potwierdzające tych związków.
  Związki określone przez normy zostaną potwierdzone przy użyciu tej samej technologii w innych laboratoriach. Jednym z celów, które sobie wyznaczyliśmy, jest koordynacja tego działania również poprzez wsparcie międzynarodowych stowarzyszeń.
• W TRAKCIE - Badanie kinetyki opadów antygenów związanych z aluminium.

Analiza metagenomiczna

• W TRAKCIE - Analiza z dodatkowymi standardami kontroli DNA i RNA innej partii na szczepionkę.
  Od początku tego projektu było dla nas jasne, że analizy, aby spełnić niezbędne wymagania dotyczące powtarzalności i dokładności danych, musiały być przeprowadzane przy użyciu najnowocześniejszych instrumentów i monitorowania wszelkich różnic między partiami i między różnymi partiami. W trakcie dochodzeń inne części są stale analizowane, oczywiście ograniczone do kosztów i dostępności produktów.
• W TRAKCIE - Analiza sekwencjonowania genomu płodowego DNA z linii komórkowej MRC-5.
  Już podczas pierwszego badania mieliśmy możliwość standardowego potwierdzenia, że ​​zastosowane linie diploidalne to MRC-5, jak podano w karcie danych. Chcemy pogłębić badanie tej linii komórkowej również ze względu na fakt, że jest ona obecna w znacznych ilościach i absolutnie znacznych rozmiarach.
• W TRAKCIE - Badanie drobnych wariantów (quasispecies) wirusów odry, świnki i różyczki.
  W porównaniu z pierwszym sprawozdaniem z lipca 2018 r. (https://goo.gl/cSspVH) zleciliśmy dogłębne badanie mniejszych wariantów, ponieważ mutacje atenuowanych wirusów szczepionkowych nie były jedynymi stwierdzonymi. Ten element budzi również ogromne wątpliwości co do skuteczności i bezpieczeństwa szczepionki. Wynik potrwa dłużej niż inne raporty, ponieważ weryfikacja sekwencji różnych mutantów musi być wykonana ręcznie.
• W TRAKCIE - analiza potwierdzeń międzylaboratoryjnych
  Zidentyfikowaliśmy zagraniczne i krajowe laboratoria, w których zleciliśmy standardową replikację analiz. Ten wynik będzie dostępny wkrótce.

Projekty w trakcie oceny

Badanie siły działania antygenów szczepionkowych: badanie to musi zostać przeprowadzone w ośrodku akredytowanym przez agencje regulacyjne do badań przedklinicznych szczepionek. Celem jest sprawdzenie, czy antygeny szczepionkowe są zdolne do wytwarzania lub wiązania się ze specyficznymi przeciwciałami (teoretycznie zakłada się, że te przeciwciała są ochronne, ale ta analiza nie pozwala wykazać, że szczepionka jest w stanie chronić przed chorobą). Koszt tego kroku może być znaczny, dlatego projekt jest na razie hipotetyczny.

Download: CORVELVA-raport-z-wyniki-ottenuti.pdf