We beschrijven enkele punten die ons zorgen baren, we verwachten dat toen we aan deze analyses begonnen, van metagenomica tot de huidige chemie, we veel vragen hadden en alleen naar antwoorden zochten ... met de eerste resultaten hebben we nog meer vragen en vooral zorgen!

Het kwalitatief-kwantitatieve onderzoek van organische verbindingen is van groot belang op farmacologisch gebied. Er zijn potentiële veiligheidsproblemen die voortvloeien uit nieuwe productieprocessen en de complexe structurele en biologische kenmerken van de producten.

Hieruit volgt dat het volgende werd gevonden in het vaccin:

• Chemische verontreinigingen door het productieproces of door kruisbesmetting met andere productielijnen
• Chemische toxines
• Bacteriële peptide-toxines
• Onoplosbaar en onverteerbaar macromolecuul dat reageert op de eiwittest maar niet wordt herkend door eiwitdatabases

De aanwezigheid van:

• Eiwitantigenen van difterietoxoïden, tetanus, pertussis, hepatitis B, Haemophylus influenzae B, Poliomyelitis 1-2-3
• Formaldehyde en glutaaraldehyde, fenoxyethanol, antibioticaresiduen aangegeven in de samenstelling

Er zijn zes antigenen aanwezig in het Infanrix Hexa-vaccin: de tetanustoxiden, difterie en pertussis, de D-antigenen van de drie poliomyelitisvirussen, de eiwitten die zijn verkregen door genetische manipulatie voor hepatitis B en de polysacchariden van de haemophylus chemisch gekoppeld aan de tetanustoxoïd als vervoerder. Om toxoïden te vormen is een behandeling met formaldehyde en glutaaraldehyde nodig die het mogelijk zou moeten maken om toxiciteit te elimineren terwijl hun vermogen om beschermende antilichamen tegen de oorspronkelijke toxines te stimuleren behouden blijft.

Wat we verwachtten te vinden waren de drie toxoïden en de andere antigenen die niet waren gemodificeerd door formaldehyde- en glutaaraldehydebehandelingen, van elkaar te scheiden en verteerbaar door het specifieke enzym voor eiwitten (trypsine). In plaats daarvan werd een echt polymeer, onoplosbaar en onverteerbaar, gevonden, bestaande uit de set chemisch gekoppelde antigenen (te definiëren indien aanwezig als een aggregaat van de individuele antigenen of een enkele macromolecule), waarover ook informatie wordt gevonden in de literatuur voor individuele antigenen. ^1-2
Dit macromolecuul is op geen enkele manier herkend door eiwitdatabases en lijkt daarom in feite een vaste stof met onbekende chemische structuur te zijn.

De oplosbaarheid van eiwitten en de mogelijkheid om ze te verteren (d.w.z. ze in kleine peptidefragmenten te snijden) zijn de twee typische kenmerken van eiwitten, waardoor we ze niet kunnen bestuderen met de methoden voor de analyse van eiwitten maar ze zijn ook een noodzakelijke vereiste voor interactie met het immuunsysteem voor de vorming van beschermende antilichamen, want als de structuur van een eiwit grondig is gewijzigd ten opzichte van het oorspronkelijke, zijn zelfs de gevormde antilichamen compleet anders dan de antilichamen die de oorspronkelijke antigenen die ziekten veroorzaken, kunnen aanvallen.

Aangezien dit polymeer dat we tegenkwamen, afgeleid van de mix van antigenen, niet alleen verschilt vanuit het oogpunt van de ruimtelijke conformatie, maar bovenal verschilt vanuit het chemische oogpunt, we kunnen zeggen dat we niet in aanwezigheid zijn van antigenen die vergelijkbaar zijn met de oorspronkelijke, maar van een verbinding met onbekende en onvoorspelbare toxiciteit en werkzaamheid.

Naast het feit dat vaccinantigenen niet daadwerkelijk werden gedetecteerd, werden 65 signalen van chemische verontreinigingen gevonden waarvan 35% bekend is, dat wil zeggen herkend in vergelijking met de databases; onder deze vinden we verschillende verwerkingsresiduen en kruisbesmetting van andere productielijnen, waarvan de identificatie zal worden geverifieerd in de analyse op het tweede niveau (d.w.z. met controlestandaarden).

Van deze signalen zijn ook 7 chemische toxines geïdentificeerd, waarschijnlijk afkomstig van het antigeen verwerkingsproces of van andere productieprocessen die aanwezig zijn op de vaccinproductielocatie; deze toxines die nog niet duidelijk in de structuur zijn gedefinieerd, lijken gedeeltelijk voort te vloeien uit de reactie van formaldehyde, glutaaraldehyde en cyaanbromide met andere chemische verontreinigingen in het vaccin. Er wordt benadrukt dat de meeste van deze toxines een gevestigde en gepubliceerde toxiciteit hebben in Pubchem ³ of Toxnet ⁴ e vormen een aanzienlijk beveiligingsprobleem.

Verschillende vrije peptiden (d.w.z. korte fragmenten van aminozuurketens) van bacteriële oorsprong resulteerden uit de studie van de eiwit- en peptidefractie, die daarom afkomstig zijn van bacteriecultuurcellen voor de extractie van antigenen. Bacteriële peptiden worden in de literatuur gerapporteerd als mogelijke allergenen ⁵ en in staat om auto-immuunreacties te induceren ⁶ en deze vormen ook een veiligheidsprobleem dat moet worden opgehelderd met regelgevende instanties.

Terugkerend naar de twee hoofdpijlers die ons ertoe hebben gebracht dit analysepad te beginnen en het concept herhalen dat wordt uitgedrukt door recent interview in het prestigieuze wetenschappelijke tijdschrift Nature: we onderzoeken de werkzaamheid en veiligheid van vaccins en in werkelijkheid is het moeilijk te begrijpen hoe het mogelijk is om te zeggen dat dit vaccin beschermende antilichamen kan vormen tegen de zes ziekten waarvoor we onszelf beschermen en het is zelfs nog moeilijker om te begrijpen hoe kan worden vastgesteld dat dit cluster niet giftig is bij zuigelingen, omdat het een kwestie is van 6 neurotoxische antigenen die aan elkaar zijn gekoppeld.

De zeswaardige Infanrix hexa, voor de methode die we in gebruik hebben genomen, laat enorme twijfels over zowel de effectiviteit als de veiligheid ervan ...

We verzekeren u één ding: we zullen niet stoppen.

 Download link: CORVELVA-Report-analyse-composition-chemisch-Infanrix-Hexa.pdf

Referenties

1. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2017 juni 1; 1054: 80-92 - Het gecombineerde gebruik van analytische hulpmiddelen voor het verkennen van tetanustoxine en tetanustoxoïdstructuren.
2. Vaccin. 2007 8 maart; 25 (12): 2213-27. - Onderzoek naar het ontgiftingsmechanisme van met formaldehyde behandelde tetanustoxine.
3. https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/search/
4. https://toxnet.nlm.nih.gov/
5. Int J Med Microbiol. 2018 augustus; 308 (6): 738-750. - De zoektocht naar bacteriële allergenen.
6. Voor Microbiol. 2017 oktober 9; 8: 1938 - Morbide sequenties suggereren moleculaire nabootsing tussen microbiële peptiden en zelfantigenen: een mogelijkheid tot het aanzetten tot auto-immuniteit.

inzichten

Het Infanrix Hexa-vaccin heeft de volgende samenstelling, we kopiëren dit getrouw uit het huidige technische gegevensblad gegevensblad van de fabrikant:

Het antigeenpreparaat dat hieronder wordt vermeld, is dat aangegeven in het EMA-rapport voor de handelsvergunning van Infanrix Hexa. ¹

Difterietoxoïde: Difterietoxoïde wordt verkregen door het toxine (geproduceerd door Corynebacterium diphtheriae) te deactiveren met formaldehyde bij 37 ° C in een enigszins basische omgeving en wordt vervolgens geadsorbeerd op aluminiumzouten (hydroxide en fosfaat)

Tetanustoxoïde: De tetanustoxoïde wordt verkregen met dezelfde procedure als de difterietoxoïde (Clostridium tetani is een obligate anaërobe sporogene bacterie en produceert tetanospasmin, een neurotropisch toxine dat werkt door de synapsen te blokkeren die de reflexspiercontractie remmen)

Pertussische toxoïde: De componenten van het acellulaire kinkhoestvaccin worden verkregen door extractie en zuivering van fase I-culturen van Bordetella pertossis (een aerobe coccobacillus, die vier toxines kan produceren: pertussistoxine, adenylaatcyclasetoxine, dermonecrotisch toxine, tracheale cytotoxine). en twee soorten lipopolysaccharide; voor de bereiding van het acellulaire vaccin wordt alleen het pertussistoxine gezuiverd en gebruikt), gevolgd door onomkeerbare ontgifting van het pertussistoxine door behandeling met glutaaraldehyde en formaldehyde en behandeling met formaldehyde van de filamenteuze hemagglutinine- en pertactinecomponenten; de verschillende componenten worden vervolgens geadsorbeerd op aluminiumzouten.

Hepatitis B oppervlakte-antigeen: het wordt geproduceerd uit genetisch gemodificeerde Saccharomyces cerevisiae-kweken die codeert voor het gen voor het oppervlakte-antigeen van het hepatitis B-virus; dit antigeen wordt gezuiverd door verschillende chemisch-fysische stappen en assembleert spontaan tot bolvormige deeltjes met een diameter van ongeveer 20 nm die het polypeptide-antigeen en een fosfolipidenmatrix bevatten. Dit antigeen wordt vervolgens geadsorbeerd op aluminiumfosfaat.

Poliovirus (geïnactiveerd): Salk-vaccin, of geïnactiveerd polio (IPV), is gebaseerd op drie wilde, virulente referentiestammen: Mahoney (type 1 poliovirus), MEF-1 (type 2 poliovirus) en Saukett (type 3 poliovirus), gekweekt in VERO-cellijn: dit is een onsterfelijk gemaakte cellijn die in 1962 werd verkregen uit de nieren van volwassen Afrikaanse apen (vervets); voor de productie van het vaccin worden de cellen onderworpen aan 130-140 voortplantingspassages (laag niveau van voortplanting). Opgemerkt moet worden dat na de 200 passages de cellijn kankerverwekkend wordt bij muizen; het kweekmedium voor de groei van de VERO-lijn is van dierlijke oorsprong (en moet daarom getest worden op de aanwezigheid van contaminerende virussen en prionen), terwijl Medium 199 wordt gebruikt voor de groei van het virus, dat geen stoffen van dierlijke oorsprong bevat. Na te zijn geïsoleerd en gezuiverd, worden levende virussen geïnactiveerd met formaldehyde.
Van wat bekend is bij de EMA, bevat het vaccin niet de virussen als zodanig, maar de eiwitten geproduceerd door de drie stammen, genaamd Antigen D; deze proteïnen worden gevormd vóór behandeling met formaldehyde en glutaaraldehyde dat de functie heeft van het inactiveren van toxoïden en het vernietigen van al het genetische materiaal, afkomstig van Vero-cellen, mogelijk carcinogeen, maar ook dat van de poliomyelitisvirussen.

Polysacharide van Haemophilus influenzae type b: het is bereid uit de bacteriestam Hib 20,752 (er zijn niet-ingekapselde, niet-typeerbare stammen en capsules, antigeen te onderscheiden in 6 verschillende typen, aangeduid met de letters van het alfabet van a tot f. De meest voorkomende en minder ernstige infecties veroorzaakt door Hib zijn die welke invloed hebben op de bovenste luchtwegen, en worden meestal ondersteund door niet-capsule capsules. Invasieve infecties, zoals meningitis, worden in plaats daarvan voornamelijk veroorzaakt door capsulecapsules, vooral type b)
Het polysacharide wordt verkregen uit de groei van de bacteriestam in een synthetisch kweekmedium en na activering met cyaanbromide en derivatisering met een hydrazide-adipische spacer wordt het via carbamidische condensatie gekoppeld aan het tetanustoxoïd; na zuivering wordt het conjugaat geadsorbeerd op aluminiumzouten en vervolgens gevriesdroogd in aanwezigheid van lactose als stabilisator. De conjugatie met het tetanustoxoïde is noodzakelijk om antigeniciteit aan het polysaccharide te verlenen, aangezien het het polysaccharide van T-onafhankelijk antigeen in T-afhankelijk antigeen verandert.

Eindproduct: de steriele concentraten geabsorbeerd op aluminium van DT, PT, FHA, PRN en HBsAg en de driewaardige component van IPV worden gemengd met een steriele oplossing van natriumchloride en water voor injectie en toegevoegd met een steriele oplossing van 2-fenoxyethanol.
2-fenoxyethanol is een antimicrobieel middel en wordt aan het eindproduct toegevoegd omdat definitieve sterilisatie door filtratie van de DTPa-HBV-IPV-component niet mogelijk is en de opalescentie van de suspensie microbiële verontreiniging kan maskeren.